康宁生命科学提供3D细胞培养的全面解决方案,包括用于培养多细胞球的球形微孔板或Elplasia培养板,用于培养类器官的Matrigel基质等。
类器官能够模拟体内器官的构成和功能,在疾病模型和药物开发领域的应用越来越广泛。细胞外基质(Extracellular matrix, ECM)是细胞外环境的重要构成,它给细胞提供了具有一定孔隙和刚性的基质环境,提供细胞粘附的机械支持,帮助形成稳定的组织结构,并介导结构中细胞的迁移、定位、极化和信号传导等1,2。
康宁类器官培养专用Matrigel基质是经过优化、并验证可支持类器官生长和分化的细胞外基质。通过以下验证,康宁类器官培养专用Matrigel基质满足了成功培养类器官的一致性和可靠性需求:
经验证可支持类器官培养物的生长和分化,包括:
- 长期培养小鼠小肠类器官,7代以上仍具有典型的类器官 出芽形态和标记物表达3;
- 培养原代人气道上皮细胞并分化成极化的3D上皮4。
每个批次均测量弹性模量。弹性模量指征了用于类器官实验所需的基质刚度。
每个批次均被验证可形成稳定的“3D圆顶”结构。“3D圆顶”是类器官培养中常用的一种方式。
被证明用健康或患病细胞均可成功培养类器官4。
作为一种优化的细胞外基质,康宁类器官培养专用Matrigel基质免除了耗时的筛选和验证过程,实现了类器官研究中必不可少的可重复性和一致性。
应用领域
类器官的生长和分化
类器官带来了器官发生、疾病模型以及患者个性化治疗的进展。将来自正常或患病组织的干细胞或器官祖细胞与康宁Matrigel基质混合,可用于产生肾脏、甲状腺、肝脏、脑、肺, 肠、前列腺、胰腺、乳房、食道和卵巢的微器官。
由于康宁Matrigel基质与体内环境极为相似,可提供必要的生长因子、蛋白以及所需的基质结构,已成为类器官应用最广、发表文章最多的水凝胶。
康宁正与拓展Hans Clevers教授工作的类器官前沿机构Hubrecht Organoid Technology(HUB)合作。这项合作结合了HUB在类器官体外模型和模拟器官功能领域的专业知识,以及康宁优化类器官培养工具方面的经验,旨在为研究群体提供更好的类器官应用工具和资源,并进一步推动类器官技术的发展。
注:Hans Clevers教授为荷兰艺术与皇家科学院主席、美国国家科学院院士,是干细胞和类器官领域的大师级领军人物。其实验室首次证明了从Lgr5+干细胞形成胃肠道类器官,具有里程碑的意义。
在康宁类器官培养专用Matrigel基质中生长的肠道类器管,表现出典型的出芽形态和标志物表达(波形蛋白、粘蛋白-2、绒毛蛋白、嗜铬粒蛋白和溶菌酶)3。
在康宁类器官培养专用Matrigel基质中生长的气道类器官,表达基底细胞(绿色)、纤毛细胞(红色)和杯状细胞(橙色)的典型分化标志物4。
参考文献
1.Hartman CD, et al. Extracellular matrix type modulates cell migration on mechanical gradients. Experimental Cell Research, 359(2):361-366, 2017.
2.Bryant DM, et al. A molecular switch for the orientation of epithelial cell polarization. Dev Cell. 2014 Oct 27;31(2):171-87.
3.Application Note (Corning Lit. Code CLS-AN-542): Culture of mouse intestinal organoids in Corning Matrigel matrix for organoid culture.
4.Application Note (Corning Lit. Code CLS-AN-534): High throughput gene expression analysis of 3D airway organoids.
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