在食品安全检测中应用ATCC8739大肠杆菌时，需要注意以下几方面问题：
菌株的保存与复苏
保存条件：应严格按照要求在-20°C以下密闭保存冻干品，以保证菌株的活性和稳定性，避免因保存温度不当导致菌株死亡或变异。
复苏操作：复苏时要使用合适的培养基和正确的操作方法。例如采用 MH 培养基或 TSB 培养基，在 37℃有氧条件下进行培养。
防止污染：无论是保存还是复苏过程，都要防止其他杂菌的污染。接种过程应在生物安全柜中进行，使用的器材和试剂都要经过严格的灭菌消毒。
实验操作过程
无菌操作：整个检测过程必须严格遵循无菌操作原则，防止引入其他杂菌影响检测结果的准确性。操作人员要做好个人防护和实验环境的清洁消毒，使用的仪器设备、培养皿、移液管等都要经过灭菌处理。
准确接种：接种时要确保接种量准确、均匀，避免接种量过多或过少影响检测结果的判定。同时，要注意接种的方式和部位，保证菌株能够在培养基上良好生长。
培养条件控制：严格控制培养温度、时间和气体环境等条件。ATCC8739大肠杆菌的适宜培养温度为 37℃，需根据具体的检测方法和要求，准确控制培养时间，以确保检测结果的可靠性。
检测方法的选择与验证
方法适用性：根据不同的食品样品类型和检测目的，选择合适的检测方法。常见的检测方法包括多管发酵法、滤膜法、平板计数法、气相色谱法、高效液相色谱法、ATP 生物发光技术、PCR 检测技术等，各方法都有其优缺点和适用范围，需综合考虑后选择。
方法验证：在使用选定的检测方法前，要进行方法验证，确保该方法能够准确、可靠地检测出ATCC8739大肠杆菌。验证内容包括检测限、回收率、精密度、准确度等指标，以保证检测结果的有效性。
质量控制与结果判定
阳性对照与阴性对照：设置阳性对照和阴性对照是保证检测结果准确性的重要措施。阳性对照应使用已知的ATCC8739大肠杆菌菌株，阴性对照则使用无菌水或其他无大肠杆菌污染的样品，通过对照实验可以排除实验过程中的假阳性或假阴性结果。
结果判定标准：熟悉并严格按照相关标准和规范对检测结果进行判定。不同的检测方法和食品类型可能有不同的判定标准，例如在菌落计数法中，要根据规定的稀释度和菌落数范围来确定食品中大肠杆菌的含量是否超标。
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