产品货号: 554656
英文名称：Stain Buffer (FBS)
产品规格：500 mL
产品品牌：BD
产品简介：
BD Pharmingen stain buffer染色缓冲液(FBS)可用于淋巴组织、骨髓、外周血或培养细胞制备的单细胞悬液的免疫荧光染色。染色缓冲液(FBS)对荧光试剂的稀释和应用以及用于流式细胞仪分析的细胞的悬浮液、洗涤和存储都是有用的。基于之前对染色培养基的报道，染色缓冲液(FBS)被配制成中性pH (pH 7.4)缓冲盐溶液(即DPBS)，其中添加了热灭活(56°C, 30分钟)胎牛血清(FBS)蛋白。因此，染色缓冲液(FBS)旨在维持细胞活力，并最大限度地提高ph敏感荧光色素(如异硫氰酸荧光素(FITC))产生的荧光信号强度。此外，染色缓冲液(FBS)含有代谢抑制剂。NaN3抑制抗体交联引起的细胞表面抗原的潜在再分配(例如，由于脱落或内化)。因此，在后续的流式细胞术分析中，NaN3(与维持低温环境温度相结合)可以防止免疫荧光染色细胞产生的荧光信号强度的潜在损失。
产品应用:
流式细胞术(常规检测)
运输与储存：
保存在4°C未稀释。
推荐的实验流程：
1. 使用标准方案从淋巴组织、骨髓、外周血或细胞培养中制备单细胞悬液。
2. 在冷染色缓冲液(FBS)中洗涤细胞两次，并通过离心将细胞制成颗粒(例如，在4°C下300 x g)。用冷染色缓冲液(FBS)重悬细胞颗粒至最终浓度为2 × 10e7 cells/ml。
3.将50µl等量的细胞悬液(10e6细胞)分配到试管或微孔板的圆底孔中。
4. 在染色缓冲液(FBS)中稀释荧光抗体至预定的最佳浓度，并将少量稀释抗体(如10µl)加入含有目标细胞悬液的试管或微孔中。在避光冰上孵育20分钟。染色时间可能增加(≥45分钟)取决于荧光抗体的热情。
5. 用200µl(微孔板)或1ml(试管)染色缓冲液(FBS)洗涤细胞两次，以去除未结合的抗体。细胞以300 x g离心5分钟。每次离心后，小心地抽吸(用于微孔板或试管)或倒置并吸走(用于试管)细胞颗粒上清。
6. 将细胞颗粒重悬在200µl(用于微孔板)或0.5 ml(用于试管)的染色缓冲液(FBS)中。将染色细胞从微孔板转移到适当的试管中进行流式细胞分析(将最终体积调整到~0.5 ml)。
7. 染色后尽快(如≤4小时)用流式细胞仪分析染色后的细胞样本。如果必须延迟分析，那么染色细胞可以用缓冲多聚甲醛固定(例如，BD Cytofix™固定缓冲液;猫。编号554655)，4°C保存(避光)。应尽快对固定的细胞进行分析(如染色和固定后一周)
注1:染色缓冲液(FBS)同样可以用于细胞的间接免疫荧光染色。在这种情况下，当使用未标记或生物素化一抗时，重复步骤4和步骤5。当使用生物素化抗体和荧光偶联亲和素对细胞进行染色时，最好使用不含生物素的染色介质，如染色缓冲液(BSA) (Cat。554657号)
注2:染色缓冲液(FBS)也可用于固定细胞表达的表面抗原的免疫荧光染色和细胞内抗原(如细胞因子)的免疫荧光染色。细胞内细胞因子染色的细胞可以在流式细胞仪分析之前，在染色缓冲液(FBS)中重悬和维持(例如，在4°C，避光)。
关于公司：
BD 多色流式细胞术提供了各种目标细胞亚群的快速、多参数分析。其应用包括免疫学、免疫肿瘤学、病毒学、免疫监测等。
BD Biosciences开发了跨越每条激光线的创新染料，以提供多色实验方案设计灵活性和全面的偶联抗体组合，帮助深度表征表面、细胞内或分泌标记物。从简单到复杂研究应用的流式细胞仪和分选仪，到广泛的试剂选择和教育资源、工具和方案的全面收集，我们支持您有效地管理多色流式细胞仪工作流程。
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