ATCC76484新型隐球菌Cryptococcus neoformans

基本信息

• 分类地位：属于担子菌门、银耳纲、银耳目、隐球菌科、隐球菌属，酵母型真菌，为该属中致病性最强的物种之一，血清型多为A 型（全球流行最广的血清型，尤其与免疫缺陷人群感染高度相关）。同义编号包括 CBS 10079、CCRC 21549、IFO 10627 等，是国际公认的致病性隐球菌研究株。

• 分离来源：主要分离自人类临床感染样本（如艾滋病患者的脑脊液、支气管肺泡灌洗液），可引发系统性隐球菌病，尤其易侵犯中枢神经系统导致隐球菌性脑膜炎，是免疫低下人群中真菌相关死亡的重要病原体。

形态与生理特征

• 形态：

• 酵母相细胞呈圆形或椭圆形，直径 5~10 μm，革兰氏染色阳性，以出芽方式繁殖（芽体较大，与母体连接紧密，单芽为主，无假菌丝）；厚荚膜显著（印度墨汁染色可见宽大透明环，荚膜厚度可达细胞直径的 1~2 倍，是其核心毒力结构，可抵抗宿主吞噬细胞作用），无真菌丝，在组织中常形成酵母细胞团。

• 培养特性：需氧菌，37℃下生长旺盛（致病性隐球菌的关键标志，区别于非致病性隐球菌的低温偏好），在沙氏葡萄糖琼脂（SDA）上 25~37℃培养 48~72 小时后，形成圆形、表面光滑、边缘整齐的菌落，直径 2~5 mm，颜色为乳白色至浅棕褐色，质地柔软、略带黏性（因荚膜多糖分泌），老龄菌落因黑色素积累逐渐变为深棕褐色；在液体培养基中呈均匀混浊，静置后底部可有少量沉淀。

• 生理特性：

• 生化反应：脲酶强阳性，不发酵糖类；能高效同化葡萄糖、半乳糖、蔗糖、肌醇、甘露醇等碳源；在咖啡酸琼脂或左旋多巴培养基上快速产生黑色素（24~48 小时菌落呈棕黑色，酚氧化酶活性高，是鉴别诊断的核心特征）；耐渗透压能力较强，可在含 5% NaCl 的培养基中生长。

• 毒力因子：除厚荚膜和黑色素（抗氧化、免疫逃逸）外，还能产生磷脂酶 B（破坏宿主细胞膜）、脲酶（调节微环境 pH）及荚膜多糖（引发免疫复合物介导的组织损伤），易通过呼吸道入侵并经血行播散至中枢神经系统，导致致命性感染。

培养与储存条件

• 培养条件：需氧环境，最适温度 35~37℃（模拟人体体温，利于毒力因子表达），pH 5.5~7.0；常用培养基为 SDA（基础培养）、脑心浸液琼脂（BHI，增强生长和荚膜形成），培养时间 48~72 小时（37℃下生长速度显著快于 25℃）。

• 储存条件：短期可在 2~8℃ SDA 斜面密封保存（1 周内，避免干燥导致荚膜萎缩）；长期需 - 80℃冷冻（含 15% 甘油的 BHI 培养液，避免反复冻融）或冻干保存（2~8℃储存），以维持荚膜完整性和致病性。

主要用途

1. 血清型 A 隐球菌的实验模型：

• 作为血清型 A 的代表性菌株，用于研究该血清型的特异性毒力机制（如荚膜多糖合成的分子调控、与宿主免疫系统的相互作用）、耐药性产生的遗传基础（如 ERG11 基因突变与氟康唑耐药的关联），为全球隐球菌病的流行特征和防控策略研究提供依据。

2. 抗真菌药物敏感性测试的质控株：

• 用于验证抗真菌药物（如两性霉素 B、氟康唑、伏立康唑、泊沙康唑）体外活性检测方法的准确性，确定 MIC（最小抑菌浓度）参考值，为临床制定重症隐球菌感染（如脑膜炎）的治疗方案提供标准化数据。

3. 感染模型与治疗评估：

• 常用于构建小鼠系统性感染模型（如静脉注射、颅内接种），模拟人类隐球菌病的病理过程（如脑膜炎症、脏器播散），评估新型抗真菌药物、免疫调节剂或疫苗的体内疗效，解析宿主免疫应答（如 Th1/Th2 细胞因子平衡）在感染控制中的作用。

4. 临床诊断技术的验证工具：

• 其显著的荚膜和黑色素特性，用于验证临床检测方法（如乳胶凝集试验检测荚膜多糖抗原、实时 PCR 检测特异性基因）的敏感性和特异性，确保脑脊液、血液等样本中病原菌的快速精准识别，助力早期诊断和预后判断。