生物安全与来源:生物安全等级为 1 级(BSL-1),无强致病性,是临床 BV 治疗后复发患者常见分离株,常规超净台操作即可,器具使用后需 121℃高压灭菌 30 分钟。菌株分离自甲硝唑治疗无效的 BV 患者阴道分泌物,生物学特性与临床耐药分离株高度一致,可模拟耐药感染状态下的生殖道定植与药物耐受表型。
形态与培养特性:革兰氏染色不定(新鲜培养为革兰氏阴性短杆菌,48 小时后易转为革兰氏阳性),具物种典型特征:
显微镜形态:菌体呈短杆状或球杆状(0.4-0.6μm×0.8-1.8μm),单个或成对排列,无芽孢、无鞭毛,新鲜培养物革兰氏染色呈淡红色,陈旧培养物脱色明显;
培养要求:兼性厌氧,最适培养基为 Columbia CNA 人血琼脂、巧克力琼脂,需 5%-10% CO₂环境,最适温度 35-37℃,生长速度中等(24-48 小时形成菌落),普通营养琼脂不生长;
菌落形态:人血琼脂上形成直径 0.5-1mm 灰白色半透明菌落,边缘整齐、表面光滑,“卫星现象” 显著(靠近金黄色葡萄球菌菌落时菌落增大 1-2 倍),β- 溶血弱阳性(溶血环较 ATCC14018 更窄,可辅助菌株区分)。
生化与耐药特性:生化反应具物种特异性:氧化酶阴性、触酶阴性,发酵葡萄糖、麦芽糖产酸不产气,不发酵乳糖、蔗糖;核心优势在于稳定耐药表型:经 CLSI 标定,对甲硝唑呈中度耐药(MIC 4-8μg/mL,ATCC14018 为敏感),对克林霉素敏感(MIC 0.5-2μg/mL),对青霉素类药物耐药(MIC≥16μg/mL),耐药机制与临床常见的药物外排泵基因表达相关,是 BV 耐药检测与药物筛选的理想模型。
未开封状态:以冻干粉(真空包装,含 10^6-10^7 CFU / 支,含耐药表型保护剂)或甘油菌悬液(20% 甘油,10^5 CFU/mL,-80℃专用)供应:
冻干粉:-20℃以下冷冻保存,长期(>6 个月)建议 - 80℃储存,严禁反复冻融(活菌率下降 65% 以上,破坏耐药表型),保质期 3 年;
甘油菌:直接 - 80℃保存,室温暴露 1 小时致活力下降 45%,保质期 2 年,解冻后一次性使用。
复苏后状态:复苏菌液(巧克力肉汤培养)2-8℃冷藏 5 天内使用;斜面培养物(巧克力琼脂斜面)2-8℃冷藏 2 周内传代,传代需 5% CO₂环境,使用前需镜检确认形态,并通过甲硝唑药敏预实验验证耐药特性。
复苏操作:超净台内,冻干粉加 1mL 无菌巧克力肉汤溶解,37℃ 5% CO₂培养 24-48 小时;待菌液浑浊、镜检见典型杆菌,且人血琼脂出现 “卫星现象” 时使用。
传代培养:挑取人血琼脂单菌落,划线接种新鲜平板,37℃ 5% CO₂培养 24-48 小时;斜面保存后 2-8℃冷藏,传代≤3 代(避免耐药基因丢失)。
应用操作:
耐药质控:验证 BV 耐药菌株鉴定系统(如质谱耐药分型、PCR 耐药基因检测)准确性;
药敏测试:校准甲硝唑、克林霉素等药物 MIC 值,指导耐药 BV 治疗方案制定;
机制研究:用于耐药基因功能分析、抗耐药药物筛选(如新型甲硝唑衍生物);
试剂验证:验证 BV 诊断试剂对耐药菌株的检出能力,避免漏检。


客服1