中文名称:黄八叠球菌
拉丁学名:Kocuria rhizophila
标准编号:ATCC533
产品形式:冻干粉(含海藻糖 - 脱脂乳复合保护剂,减少冻干过程中菌体活性损失,降低渗透压损伤,复苏率≥85%)
安全等级:1 级(生物危害程度低,广泛存在于土壤、植物根际及环境中,无致病性,适用于常规实验室质控、教学实验及微生物检测场景操作,无需特殊生物安全防护)
模式菌株:非模式菌株(是考克氏菌属(Kocuria)中研究广泛的代表性菌株,因典型的八叠状排列形态、稳定的生理特性,成为微生物鉴定、培养基质控及抗菌药敏试验的核心参照菌株)
分类地位:隶属于微球菌科、考克氏菌属(原归类于微球菌属,后基于 16S rRNA 基因序列重新分类),广泛分布于土壤、植物根际、空气及水体中,是环境中常见的非致病革兰氏阳性球菌,因能产生淡黄色色素且常呈八叠状排列而得名。
形态特征:菌落呈淡黄色至浅橙黄色,直径 1-2mm,表面光滑、凸起,边缘整齐,质地致密且不透明,菌落韧性中等,接种环挑取时易破碎(区别于藤黄微球菌的坚韧菌落);菌体为革兰氏阳性,呈球形,直径 0.8-1.5μm,典型特征为八叠状排列(4 个细胞成方,2 层堆叠形成八叠体,也可见四联状或不规则聚集体),无芽孢,无鞭毛,不能运动,革兰氏染色后显微镜下呈鲜亮紫色的八叠状聚集体,形态鉴别性极强(易与葡萄球菌、微球菌区分)。
生理特性:专性好氧菌,最适生长温度 25-30℃(偏好中低温环境,37℃下生长速率略下降),生长 pH 范围 6.0-8.0,耐盐性较强(可在含 5%-10% NaCl 的培养基中生长,高盐环境下仍保持稳定活性);能发酵葡萄糖、果糖产酸不产气,不发酵麦芽糖、乳糖、蔗糖,氧化酶试验阳性,触酶试验阳性,不产生溶血素,不分解尿素,能还原硝酸盐;具备优异的耐干燥能力(干燥环境中可存活 5 个月以上),对青霉素、头孢类抗生素敏感性高,对四环素类、大环内酯类抗生素耐受性中等;无致病性,不产生毒素,不会引起人体感染或动植物疾病,代谢过程中无特殊有害产物。
培养条件:推荐使用营养琼脂培养基(NA)或哥伦比亚血琼脂培养基,30℃有氧培养 24-36h(普通培养箱静置培养即可,中低温环境更利于八叠状形态形成,37℃培养易导致排列松散),培养后淡黄色菌落均匀生长,色素稳定不扩散;液体培养选用营养肉汤培养基,30℃振荡培养(转速 150-180rpm)20-24h,菌体浓度可达 10⁸-10⁹CFU/mL,菌液呈淡黄色轻微浑浊状(因菌体聚集成团,浑浊度低于分散生长的球菌)。
活化步骤:无菌环境下(超净工作台内)开启安瓿管,用 0.5-1mL 无菌营养肉汤培养基(预热至 30℃)充分溶解菌粉,将菌液全部接种至营养琼脂平板,30℃培养 30h 后,挑取单个典型淡黄色菌落转接至 5mL 营养肉汤培养基,30℃振荡培养 20h,即可获得高活性种子液(操作简单,常规实验室环境即可完成,需注意挑取形态典型的菌落以保证八叠状排列特性)。
保存方法:未启封冻干粉 2-8℃密封避光保存,有效期 4 年;复苏后斜面菌种 4℃密封保存,每 2 个月继代一次,有效期 2 个月(继代时建议使用营养琼脂培养基,避免频繁传代导致形态特性退化);长期保存需将对数生长期菌液与 30% 无菌甘油按 1:1 体积比混合,分装至冻存管后 - 80℃冷冻保存,或真空冷冻干燥后 - 20℃保存,有效期均可达 4-5 年,严禁反复冻融(单次冻融活性损失≥25%)。
微生物检测与质量控制:作为微生物实验室的核心质控菌株,广泛用于验证培养基(如营养琼脂、血琼脂、选择性培养基)的适用性与无菌性,校准微生物计数方法(平板计数法、比浊法)的准确性;在抗菌药物敏感性试验(AST)中,常用作质控菌株评估药敏试纸、药敏板的有效性,符合 CLSI(临床实验室标准化协会)与 GB/T 21703-2008《微生物检测方法 抗菌药物敏感性试验》的质控要求;同时可用于食品、药品、化妆品行业的环境微生物污染监测,作为阳性对照评估检测流程的可靠性。
微生物鉴定与分类研究:因典型的八叠状排列形态与稳定的生理特性,成为微生物鉴定试剂(如生化鉴定卡、MALDI-TOF MS 质谱数据库)的校准菌株,帮助区分考克氏菌属与微球菌属、葡萄球菌属等近缘菌属;在分类学研究中,可作为考克氏菌属的参照菌株,通过基因序列对比明确环境中未知球菌的分类地位,为微生物群落分析提供标准参照。
教学与科研实验:作为微生物学基础教学的经典实验菌株,用于革兰氏染色、菌落形态观察、微生物形态分类(八叠状排列识别)、氧化酶 / 触酶试验等实验,帮助学生掌握球菌的形态鉴别要点与分类方法;在科研领域,可作为革兰氏阳性球菌形态形成机制研究的模型菌株,探索八叠状排列的分子调控机制,也可用于环境耐盐微生物的适应性研究,为极端环境微生物资源开发提供基础。
工业与环境领域:用于化妆品、日化产品的抗菌效果测试,评估产品对环境中非致病球菌的抑制能力;在环境监测中,可作为土壤、植物根际微生物多样性研究的指示菌株,评估生态系统的微生物群落稳定性;同时因其耐盐特性,可用于高盐工业废水处理的微生物群落优化研究,辅助提升废水处理效率。
每批次产品均通过三重质量检测:纯度检测(涂布营养琼脂与血琼脂平板,确保无杂菌污染,菌落呈典型淡黄色且无溶血,显微镜下可见八叠状排列)、活性检测(平板计数法,确保活菌数≥10⁸CFU / 支)、特性验证(API Staph 生化鉴定、16S rRNA 基因测序,符合黄八叠球菌典型生理生化与基因特征,形态特性稳定),随货附带完整 COA(分析报告),质量可追溯。
操作无需特殊生物安全防护,常规超净工作台即可完成;实验废弃物(含菌培养基、耗材)需经 121℃高压蒸汽灭菌 30min 后处理;收货后 24 小时内,若发现安瓿管破损、菌粉变色(非淡黄色)、复苏后菌落无淡黄色特征或显微镜下无八叠状排列,可立即联系售后办理退换货。


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