ATCC25845黑色素普雷沃菌Prevotella melaninogenica

中文名称：黑色素普雷沃菌

拉丁学名：Prevotella melaninogenica

标准编号：ATCC25845

产品形式：冻干菌体（含脱脂乳 - 半胱氨酸 - 维生素 K - 血红素复合保护剂，适配严格厌氧菌活性维持，保留产黑色素能力与口腔定植特性，复苏率≥80%）

安全等级：2 级（条件致病性口腔厌氧菌，主要定植于人类口腔、咽喉部黏膜，正常情况下为口腔微生态组成部分，口腔黏膜损伤或免疫力低下时引发牙周炎、扁桃体炎等感染，对人体以外生物无致病性，需在 BSL-2 实验室厌氧环境下规范操作）

模式菌株：非模式菌株，是普雷沃菌属中产黑色素特性典型的代表菌株，因产黑色素能力稳定、与口腔感染关联明确，为口腔厌氧菌鉴别诊断、牙周病机制研究及抗感染药物筛选的核心参照菌株

分类地位：隶属于拟杆菌门、普雷沃菌属，革兰氏阴性短杆菌，严格厌氧，在口腔微生物学、牙周病防治及口腔感染诊疗研究中具有重要应用价值。

菌落：厌氧血琼脂（含维生素 K、血红素）上 35-37℃厌氧培养 48-72h（需严格厌氧环境，区别于大豆疫霉菌的需氧培养），呈 “黑色或深褐色菌落”（核心鉴别特征，因产生黑色素，区别于大豆疫霉菌的白色棉絮状菌落），直径 0.8-1.2mm，表面光滑、边缘整齐，质地柔软；血琼脂上产生 β- 溶血（弱于大豆疫霉菌无溶血特性的差异显著）；可发酵多种糖类（如葡萄糖、乳糖、麦芽糖，产酸不产气，与大豆疫霉菌的不发酵糖类、依赖植物营养特性完全相反），能利用口腔黏膜分泌物中的蛋白质降解产物（如多肽、氨基酸，适配口腔微环境营养特点，大豆疫霉菌无此代谢能力）。

菌体：革兰氏阴性短杆菌（0.5-0.8μm×1.0-2.0μm，远小于大豆疫霉菌的 5-8μm 菌丝直径），无芽孢、无鞭毛（不运动，大豆疫霉菌游动孢子阶段有双鞭毛）；氧化酶阴性、触酶阴性（与大豆疫霉菌的酶学特性无关联性，因分类差异极大）；产黑色素能力稳定（培养 48h 后菌落开始变黑，72h 完全呈黑色，是口腔厌氧菌重要鉴别指标，大豆疫霉菌无色素产生）；不产生植物致病性酶（如果胶酶、纤维素酶，与大豆疫霉菌的植物组织降解酶差异显著）；无多重耐药基因（对甲硝唑、克林霉素敏感，对青霉素耐药，耐药谱适配口腔感染治疗需求，大豆疫霉菌无抗生素耐药概念，仅对杀菌剂敏感）。

特性：严格厌氧（氧分压＞0.1% 即抑制生长，与大豆疫霉菌的严格需氧特性完全相反）；最适生长温度 35-37℃（适配人体口腔温度，大豆疫霉菌适配 25-28℃植物生长环境）；生长 pH 6.5-7.5（偏中性，适配口腔唾液 pH，大豆疫霉菌的土壤 pH 适配范围一致）；口腔定植能力强（通过表面黏附蛋白结合牙菌斑、口腔上皮细胞，大豆疫霉菌无人体定植能力）；参与口腔生物膜形成（是牙菌斑生物膜的重要组成部分，与其他口腔菌协同作用引发牙周病，大豆疫霉菌无生物膜形成能力）。

培养：用口腔厌氧菌专用培养基（如 CDC 厌氧血琼脂 + 维生素 K + 血红素），35-37℃厌氧培养（采用厌氧培养箱，维持 90% N₂、5% H₂、5% CO₂混合气体）48-72h（培养时间短于大豆疫霉菌的 5-7 天）；液体培养用脑心浸液厌氧肉汤（添加 0.5% 半胱氨酸 + 0.001% 维生素 K），35℃静置厌氧培养 48h，菌体浓度达（6.0±1.0）×10⁸CFU/mL（以单细胞浓度计量，大豆疫霉菌以菌丝体干重计量），菌液呈棕褐色浑浊（因黑色素溶解，大豆疫霉菌培养液为菌丝碎片浑浊）。

保存：冻干品 4℃密封厌氧保存 3 年（需严格厌氧环境，大豆疫霉菌需干燥环境）；复苏后斜面需置于含厌氧指示剂的厌氧罐中 4℃保存 1 个月（保存时间与大豆疫霉菌的 1-2 个月接近），每 2 周继代 1 次（频繁继代以维持厌氧活性与产黑色素能力，大豆疫霉菌需防止致病力衰退）；长期液氮冷冻（15% 甘油 + 0.5% 半胱氨酸 + 0.001% 维生素 K，厌氧条件下分装），有效期 2-3 年，产黑色素能力与口腔定植相关特性保留率≥85%（大豆疫霉菌保留率为孢子萌发率与致病性，此为代谢与功能特性保留）。

应用：口腔感染机制研究（分析其产黑色素能力、毒力因子与牙周病、扁桃体炎的关联机制）；口腔厌氧菌鉴别诊断（作为产黑色素厌氧菌的阳性对照，建立快速检测方法，大豆疫霉菌无诊断应用场景）；牙周病治疗药物筛选（测试新型口腔抗菌药物对该菌的抑制效果，确定最佳用药方案，大豆疫霉菌筛选方向为植物杀菌剂）；口腔生物膜模型构建（用于模拟牙菌斑生物膜形成过程，评估口腔护理产品的干预效果，大豆疫霉菌无此应用）。

安全：BSL-2 实验室厌氧生物安全柜内操作（需防范氧气接触导致菌株失活，同时避免菌体气溶胶引发呼吸道暴露，大豆疫霉菌需防范孢子扩散污染农田）；实验器具需高温灭菌（121℃30min，杀灭厌氧菌，与大豆疫霉菌灭菌要求一致）；泄漏后无需特殊消毒（暴露于空气后菌株快速失活，无感染风险，大豆疫霉菌需用次氯酸钠消毒）；操作人员无需医学监测（对人体危害局限于口腔感染，正常操作无暴露风险，大豆疫霉菌对人体无害），适配口腔微生物实验室、牙科研究机构及口腔药物研发场景。