ATCC27336 肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)产品说明
一、菌株基础信息
本品对应菌株为 ATCC27336 肺炎链球菌,隶属于链球菌科链球菌属,是经 ATCC(美国典型培养物保藏中心)严格完成标准化鉴定与专业保藏的标准菌株。该菌株遗传特性稳定,生物学特征经多轮系统验证,信息清晰准确,作为人类呼吸道常见致病性链球菌,是微生物领域肺炎链球菌致病机制研究、疫苗研发及临床检测质量控制的核心参照菌株。其专属菌株编号具有唯一性,能为实验溯源提供清晰依据,同时保障不同批次、不同实验室间实验结果的精准比对,为肺炎链球菌相关科研与临床检测工作的可靠性奠定基础。
二、生物学特性
形态特征
该菌株为革兰氏阳性球菌,在显微镜下观察呈矛头状或圆形,常以双球菌形式排列(两个菌体相对的一侧扁平,呈 “瓜子仁” 状),偶见短链状排列,短链多由 2-4 个细胞构成。菌株无芽孢生成,不具备鞭毛结构,无法自主运动,所有菌株均能形成明显荚膜,荚膜厚度因培养条件略有差异,需通过荚膜染色法(如墨汁负染法)可清晰观察到透明荚膜轮廓。在血琼脂平板上培养后,形成的菌落呈灰白色、半透明状,质地柔软,表面光滑且有光泽,边缘整齐,菌落直径约 0.5-1.5mm,多数菌株表现为 α- 溶血现象,即菌落周围形成狭窄的草绿色溶血环,部分菌株在培养时间过长时,菌落中心可能出现凹陷(因自溶酶作用),这一特性是区分该菌株与其他链球菌的重要形态依据。
生理生化特性
该菌株为兼性厌氧微生物,最适生长温度与人体体温一致,处于 35-37℃区间,最适 pH 值为 7.4-7.8,生长过程需依赖一定浓度的 CO₂(5%-10%),在普通大气环境下培养生长缓慢且菌落形态不典型。在糖类发酵方面,可发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖、菊糖等糖类,发酵过程中产酸不产气;对甘露醇、山梨醇无发酵能力,不分解菊糖以外的多糖类物质。生化反应试验中,触酶试验结果为阴性,氧化酶试验呈阴性,精氨酸双水解酶试验阴性,VP 试验阴性,可水解七叶苷,能产生自溶酶(在酸性环境或培养后期可导致菌体自溶),且对奥普托欣(Optochin)敏感(在含奥普托欣的培养基上生长受抑制),这些生化特性是该菌株鉴定的核心指标,尤其是奥普托欣敏感性试验,是区分肺炎链球菌与口腔链球菌等近缘菌株的关键依据。
三、培养与保存条件
培养条件
针对该菌株的培养,推荐使用血琼脂培养基(添加 5% 绵羊血或兔血),这类培养基能满足其生长所需的营养物质及溶血特性表达需求。接种操作完成后,将培养基置于 35-37℃、含 5%-10% CO₂的培养箱内培养 18-24 小时,CO₂环境可促进菌株形成典型菌落形态、荚膜及 α- 溶血特征,避免因 CO₂不足导致的生长异常。若需扩大培养,可选用脑心浸液肉汤(BHI 肉汤)并添加 1% 酵母提取物,在与固体培养相同的温度和气体环境下,采用静态培养或低速振荡培养(100-120rpm),培养 20-24 小时后可获得高浓度菌液,且能更好保留其荚膜形成能力与致病性相关特性。培养过程中需严格控制温度波动,避免温度骤变,同时注意避免反复传代(建议传代次数不超过 5 代),防止菌株荚膜丢失或致病性减弱。
保存条件
短期保存(1-2 周)时,可将培养至对数生长期的菌株接种至含 5% CO₂的血琼脂斜面培养基,待菌落形成后,立即置于 4℃冰箱冷藏保存,冷藏期间需每 3-5 天观察一次菌株生长状态,避免因自溶酶作用导致菌株失活或污染。长期保存建议采用冷冻干燥保存法,将处于对数生长期的菌液与专用保护剂(如 20% 甘油、10% 脱脂乳,可添加 0.5% 酵母提取物增强抗冻性)充分混合均匀,分装至无菌冷冻管中,经梯度降温(-20℃预冻 3 小时,再转入 - 80℃冷冻 6 小时)后进行冷冻干燥处理。干燥完成后,将冷冻管置于 - 80℃冰箱或液氮中保存,此方式可使菌株长期保持活性,保存期限可达 3-5 年。长期保存期间,建议每 12 个月对菌株进行一次复苏,复苏后通过形态观察(重点检查荚膜)、生化试验(奥普托欣敏感性、菊糖发酵)及溶血特性检测,验证菌株纯度与生理活性,确保后续使用性能稳定。
四、应用领域
致病机制研究
作为典型的致病性肺炎链球菌菌株,ATCC27336 肺炎链球菌是肺炎链球菌致病机制研究的核心材料。可用于研究菌株荚膜的抗吞噬作用(荚膜是主要毒力因子)、毒力因子(如肺炎链球菌溶血素、神经氨酸酶)的表达与作用机制,以及菌株在呼吸道黏膜的定植、侵袭过程,同时可探究宿主免疫系统(如补体、吞噬细胞)对菌株的清除机制,为肺炎链球菌感染疾病(如肺炎、脑膜炎、败血症)的防控研究提供基础支持。
疫苗与诊断试剂研发
在肺炎链球菌疫苗(如多糖疫苗、蛋白结合疫苗)研发领域,该菌株可用于疫苗抗原性检测,评估疫苗诱导机体产生抗体的能力及抗体对菌株的中和作用;同时可作为疫苗生产过程中的质量控制菌株,验证疫苗的纯度与安全性。在诊断试剂领域,可用于肺炎链球菌诊断试剂盒(如核酸检测试剂盒、抗原检测试剂盒)的研发与质量验证,检测试剂的灵敏度、特异性与稳定性,确保临床诊断结果的准确性,为肺炎链球菌感染的早期诊断提供保障。
临床微生物检测
在临床微生物实验室领域,该菌株可用于实验室技术人员的技能培训,帮助技术人员熟悉肺炎链球菌的分离、培养、鉴定流程(如奥普托欣试验、荚膜染色、核酸检测),提升临床肺炎链球菌检测水平。此外,可用于抗菌药物敏感性试验,检测临床常用抗菌药物(如青霉素、头孢菌素、大环内酯类药物)对肺炎链球菌的抑制效果,为临床治疗肺炎链球菌感染时合理选择抗菌药物提供实验依据,避免耐药性菌株导致的治疗失败。
五、安全注意事项
该菌株为人类致病性微生物,可引起肺炎、脑膜炎、败血症等严重感染性疾病,操作时需严格遵守生物安全二级(BSL-2)实验室操作规程,操作人员需佩戴无菌手套、口罩、护目镜,必要时穿戴防护服,所有接种、培养、菌液处理及废弃物处置操作均需在生物安全柜内完成,防止菌株泄漏造成环境传播或人员感染。
实验过程中产生的废弃物(如菌液、培养基、接种工具、一次性防护用品、染色玻片)需分类收集,装入专用生物安全垃圾袋或高压灭菌容器,经高压蒸汽灭菌(121℃、30 分钟)处理后再进行后续处置,确保废弃物无活菌残留;若涉及含菌气溶胶操作(如菌液振荡、离心),需使用密封式离心管或在生物安全柜内完成,避免气溶胶扩散。实验台面、仪器设备(如培养箱、生物安全柜)使用后,需用含氯消毒剂(如 0.5% 次氯酸钠溶液)或过氧乙酸溶液擦拭消毒,作用 30 分钟后用无菌水擦拭干净,定期对实验室环境进行空气消毒(如紫外线照射或过氧化氢熏蒸),消除生物安全隐患。
菌株需由专人管理,建立严格的领用、储存、使用登记制度,详细记录菌株来源、数量、保存条件、领用人员、使用用途、使用时间及剩余菌株处理情况。严禁将菌株随意转让、赠送或带出实验室,未经相关部门批准,不得擅自扩大培养或用于非科研、检测目的。若发生菌株泄漏(如菌液泼洒、培养皿破碎)或人员意外接触(如皮肤黏膜接触、吸入气溶胶),需立即启动实验室应急预案:泄漏时需隔离污染区域,用含氯消毒剂覆盖污染表面并作用 30 分钟后清理;人员接触后需立即用生理盐水冲洗接触部位,若为黏膜接触或吸入,需及时就医检查,并上报实验室负责人与当地疾控部门,采取追踪观察、预防性用药等措施控制风险扩散。


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