形态与生化:菌体呈短杆状,大小(0.6-1.0)μm×(1.2-3.0)μm,无芽孢,周生鞭毛(4-6 根)可运动。最适生长温度 35-37℃,pH 6.0-8.0,兼性厌氧(有氧环境生长旺盛,无氧环境可利用发酵产能缓慢生长);能发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖产酸产气,可利用柠檬酸盐作为唯一碳源(柠檬酸盐试验阳性),氧化酶阴性,触酶阳性,硝酸盐还原试验阳性,吲哚试验阴性,VP 试验(乙酰甲基甲醇试验)阳性,这些生化特征是与同属其他菌株(如产气肠杆菌)区分及鉴定的关键依据。
致病性相关:为条件致病菌,广泛存在于土壤、水、食品及人和动物肠道,免疫功能低下人群(如住院患者、新生儿)易感染,可引起尿路感染、肺炎、腹腔感染及败血症等;ATCC 13047 毒力稳定,且部分菌株携带 β- 内酰胺酶基因,可作为耐药性研究的模式株,用于与临床耐药分离株的对比分析,及抗菌药物敏感性检测的阳性对照。
培养:无需特殊气体环境,推荐培养基为麦康凯琼脂(MAC,菌落呈粉红色,因能发酵乳糖)、伊红美蓝琼脂(EMB,菌落呈紫黑色,部分菌株有金属光泽)、营养琼脂(NA,用于增菌),37℃培养 18-24 小时,菌落呈圆形、光滑湿润、边缘整齐,直径 1-2mm,质地柔软,无特殊气味。
保存:短期(1-4 周)可将活化菌株接种营养琼脂斜面,4℃冷藏保存(每周需观察菌株活力,避免污染);长期(6 个月以上)建议 - 80℃甘油冷冻保存(20% 无菌甘油与菌液 1:1 混合)或冻干保存(含脱脂乳保护剂),复苏时需将菌株转接营养肉汤,37℃振荡培养 12-16 小时,待菌液浑浊后再转接固体培养基纯化,确保菌株纯度与活力。
应用:用于临床实验室肠杆菌科细菌分离鉴定的质控菌株,验证培养基(如 MAC、EMB)及生化鉴定试剂(如 API 20E 鉴定条)的有效性;作为食品(如肉类、乳制品)、水源中肠道致病菌污染检测的标准对照;核心用于抗肠杆菌科药物(如头孢菌素类、碳青霉烯类)体外药敏试验,及细菌耐药机制(如 β- 内酰胺酶产生、外排泵作用)研究;也用于微生物教学实验,演示肠杆菌科细菌的形态、生化反应及培养特性。
安全:需在生物安全二级(BSL-2)实验室操作,操作人员需佩戴无菌手套、口罩及护目镜,避免皮肤直接接触菌液或吸入气溶胶(如避免剧烈振荡菌液、使用带滤膜的移液器吸头);实验后所有污染耗材(如培养皿、移液器吸头)需经 121℃高压灭菌 30 分钟,实验台面用含氯消毒剂(有效氯 1000mg/L)或 75% 乙醇擦拭消毒;菌株储存需单独标识(标注菌株名称、编号、保存日期),与其他微生物菌株分区存放,防止交叉污染。


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