形态与生化：菌体呈短杆状，大小（0.5-1.0）μm×（1.0-3.0）μm，无芽孢，周生鞭毛（具运动性）。最适生长温度 37℃，适宜 pH 6.0-8.0，兼性厌氧（有氧环境生长更旺盛，无氧时可发酵产能）；生化特征典型：发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖产酸产气，氧化酶阴性，触酶阳性，硝酸盐还原试验阳性，吲哚试验阳性，甲基红试验阳性，VP 试验阴性，不能利用柠檬酸盐（与肠杆菌属区分的关键依据），这些特征是大肠杆菌鉴定的核心标准。
致病性相关：属于非致病菌株，自然存在于人和温血动物肠道，是肠道正常菌群的重要组成部分，无致病因子（如肠毒素、黏附素），不会引发肠道或全身感染，主要用于与致病性大肠杆菌（如 O157:H7）的对比研究，及微生物实验的安全模式株。
培养：无需特殊气体环境，常规有氧培养即可。推荐培养基包括：营养琼脂（NA，用于增菌与纯培养）、麦康凯琼脂（MAC，因发酵乳糖，菌落呈粉红色，直径 1.0-2.0mm，边缘整齐）、伊红美蓝琼脂（EMB，菌落呈紫黑色，中心有金属光泽，特征性强）。37℃培养 18-24 小时后，营养琼脂上菌落呈乳白色、表面光滑湿润，质地柔软；EMB 上的金属光泽菌落是其重要鉴别特征，便于快速识别。
保存：短期保存（1-4 周）：将活化后的纯菌株接种至营养琼脂斜面，37℃培养 12-16 小时后，密封斜面管口，置于 4℃冰箱冷藏，期间每 2 周观察 1 次，防止杂菌污染或菌株失活；长期保存（1 年以上）：采用 - 80℃甘油冷冻保存（20% 无菌甘油与对数期菌液按 1:1 体积混合，分装冻存管），或冻干保存（以 10% 脱脂乳为保护剂，冻干后置于 - 20℃以下环境）。复苏时，将冻存菌液或冻干菌粉接入营养肉汤，37℃振荡培养 8-12 小时（转速 180-200rpm），待菌液 OD600 值达 0.6-0.8（对数生长期）后，转接固体培养基纯化，确保菌株纯度与活性符合实验要求。
应用：在科研领域，作为分子生物学实验的模式菌株，用于质粒提取、基因克隆、蛋白质表达等基础实验，及肠道菌群互作机制研究；在食品检测领域，作为食品（如饮用水、乳制品）卫生检测的质控菌株，验证培养基（如 MAC、EMB）及检测方法的有效性；在教学领域，用于微生物学基础实验，演示革兰氏染色、生化反应（如吲哚试验、糖发酵试验）及细菌形态观察，帮助学习者掌握肠杆菌科细菌的特性；在工业领域，可用于发酵工艺优化（如生产重组蛋白、有机酸）的前期实验。
安全：常规操作可在生物安全一级（BSL-1）实验室进行（因无致病性）；涉及大规模培养或可能产生气溶胶的操作（如高速离心、菌液移液），需佩戴无菌手套、口罩，避免菌液接触破损皮肤。实验后，所有污染耗材（培养皿、吸头、离心管）需经 121℃高压灭菌 30 分钟，实验台面用含氯消毒剂（有效氯 1000mg/L）擦拭消毒，再用 75% 乙醇二次消毒。菌株储存需单独存放于专用冰箱，冻存管外清晰标注菌株名称、编号、保存日期，防止与其他菌株交叉污染，尤其避免与致病性大肠杆菌混淆。
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