形态与生化：菌体呈短杆状，大小（0.5-1.0）μm×（1.0-3.0）μm，无芽孢，周生鞭毛（运动性强）。最适生长温度 37℃，适宜 pH 6.0-8.0，兼性厌氧（有氧环境下生长旺盛，菌落形成快；无氧时可通过发酵葡萄糖产酸产气供能）；生化特征高度标准：发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖均产酸产气，氧化酶阴性，触酶阳性，硝酸盐还原试验阳性，吲哚试验阳性，甲基红试验阳性，VP 试验阴性，不能利用柠檬酸盐作为唯一碳源（与肠杆菌属、柠檬酸杆菌属的核心鉴别点），这些稳定的生化反应是大肠杆菌鉴定的 “金标准” 依据，也确保其在质控实验中结果的一致性。
致病性相关：属于非致病菌株，自然定植于人和温血动物肠道，是肠道正常菌群的重要组成部分，不携带肠毒素、志贺毒素、黏附素等致病因子，无引发肠道感染（如腹泻）或全身感染（如败血症）的能力；主要用于与致病性大肠杆菌（如肠出血性大肠杆菌 EHEC O157:H7、产肠毒素大肠杆菌 ETEC）的致病性对比研究，同时因无致病性且药敏结果稳定，成为临床实验室 AST 质控的 “安全标杆株”。
培养：无需特殊气体环境，常规有氧培养即可。推荐培养基包括：营养琼脂（NA，用于菌株活化与纯培养）、麦康凯琼脂（MAC，因发酵乳糖，菌落呈粉红色，直径 1.0-2.0mm，边缘光滑整齐，质地湿润有光泽）、伊红美蓝琼脂（EMB，菌落呈紫黑色，中心具鲜明金属光泽，鉴别特征显著，可快速排除非发酵乳糖杂菌）、MH 琼脂（Mueller-Hinton 琼脂，AST 实验专用培养基，需保证琼脂厚度 3-4mm，确保药敏结果准确）。37℃培养 16-24 小时后，营养琼脂上菌落呈乳白色、表面光滑，无特殊异味；MH 琼脂上菌落呈圆形、半透明，直径 1.5-2.5mm，符合 AST 实验对菌落形态的要求。
保存：短期保存（1-4 周）：将活化后的纯菌株接种至营养琼脂斜面，37℃培养 12-16 小时后，密封斜面管口（防止水分流失与杂菌污染），置于 4℃冰箱冷藏，每 2 周观察 1 次菌株活力，若出现菌落萎缩、变色或污染，需立即重新复苏纯化；长期保存（1 年以上）：采用 - 80℃甘油冷冻保存（20% 无菌甘油与对数期菌液按 1:1 体积混合，分装至无菌冻存管，避免反复冻融，防止菌株特性改变），或冻干保存（以 10% 脱脂乳为保护剂，冻干后置于 - 20℃以下干燥环境，可保存数年）。复苏时，将冻存菌液或冻干菌粉接入营养肉汤，37℃振荡培养 8-10 小时（转速 180-200rpm），待菌液 OD600 值达 0.5-0.7（对数生长期，活菌数约 10^8 CFU/mL，活性最佳）后，转接 MH 琼脂或营养琼脂纯化，确保菌株纯度与药敏特性稳定（复苏后需通过 AST 验证，确认抑菌圈直径符合标准范围）。
应用：在临床检测领域，作为 AST 实验的 “金标准质控株”，用于验证药敏实验方法（如纸片扩散法、肉汤稀释法）的有效性，校准抗菌药物（如青霉素类、头孢类、氟喹诺酮类、氨基糖苷类）的抑菌圈直径或最低抑菌浓度（MIC），确保临床药敏结果的准确性，为医生用药提供可靠参考；在科研领域，用于抗菌药物研发中体外活性评价（如新型抗生素的抑菌效果筛选），及细菌耐药机制研究的阴性对照（如验证耐药基因检测试剂盒的特异性）；在食品与药品检测领域，作为培养基（如 MAC、EMB、MH 琼脂）性能验证的质控株，评估培养基的选择性与促生长能力；在教学领域，用于微生物学实验，演示革兰氏染色（呈阴性，红色短杆菌）、药敏试验操作、生化反应原理，帮助学习者掌握肠杆菌科细菌特性与临床检测核心技术。
安全：常规操作可在生物安全一级（BSL-1）实验室进行（因无致病性，风险等级低）；涉及大规模培养（如制备药敏质控菌液）或可能产生气溶胶的操作（如高速离心、菌液移液）时，需佩戴无菌手套、一次性口罩，必要时佩戴护目镜，避免菌液接触破损皮肤或吸入气溶胶；实验结束后，所有污染耗材（培养皿、移液器吸头、离心管、药敏纸片）需经 121℃高压灭菌 30 分钟（确保彻底杀灭菌株，防止环境污染），实验台面用含氯消毒剂（有效氯 1000mg/L）擦拭消毒，再用 75% 乙醇二次消毒；菌株储存需单独存放于专用冰箱，冻存管外清晰标注 “ATCC 25922 大肠杆菌 WDCM 00013（AST 质控株）”、保存日期及操作人员，严禁与致病性大肠杆菌（如 O157:H7）混合存放，避免交叉污染导致质控结果偏差。
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