形态与生化:菌体呈短杆状,大小(0.6-1.0)μm×(1.2-3.0)μm,无芽孢,周生鞭毛(具较强运动性)。最适生长温度 35-37℃,耐受温度范围 10-44℃,适宜 pH 6.0-8.5,兼性厌氧(有氧环境生长更旺盛,菌落形成速度快);生化特征具属内鉴别性:可发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖产酸产气,能利用柠檬酸盐作为唯一碳源(柠檬酸盐试验阳性),氧化酶阴性,触酶阳性,硝酸盐还原试验阳性,吲哚试验阴性,VP 试验(乙酰甲基甲醇试验)阳性,不发酵山梨醇(与阴沟肠杆菌、产气肠杆菌的核心差异点之一),可水解七叶苷,这些稳定生化反应是霍氏肠杆菌与肠杆菌属其他菌种精准区分的关键依据。
致病性相关:属于条件致病菌,广泛存在于土壤、水、食品及医院环境中,是临床医院感染的常见病原体之一,尤其易感染免疫功能低下人群(如术后患者、肿瘤放化疗患者、新生儿),可引发尿路感染、肺炎、败血症及腹腔感染等;部分菌株携带 β- 内酰胺酶基因(如 blaKPC),对头孢菌素类、碳青霉烯类药物存在耐药性。ATCC 700323 毒力特性明确,无显著耐药基因,主要用于临床致病霍氏肠杆菌的对比研究,及 AST 实验的敏感株对照。
培养:无需特殊气体环境,常规有氧培养即可。推荐培养基包括:脑心浸液琼脂(BHI,用于菌株活化与纯培养,菌落呈乳白色、表面光滑湿润,直径 1.0-2.0mm,质地柔软)、麦康凯琼脂(MAC,因发酵乳糖,菌落呈粉红色,直径 0.8-1.5mm,边缘整齐)、伊红美蓝琼脂(EMB,菌落呈紫黑色,部分菌株中心具微弱金属光泽,与非发酵乳糖肠道菌区分)、肠杆菌选择性培养基(如 VRBA 琼脂,菌落呈红色,周围有红色晕圈)。37℃培养 18-24 小时后,各类培养基上形成典型菌落,满足鉴别与纯化需求。
保存:短期保存(1-4 周):将活化后的纯菌株接种至 BHI 琼脂斜面,37℃培养 16-20 小时后,密封斜面管口(防止水分流失与杂菌污染),置于 4℃冰箱冷藏,期间每 2 周观察 1 次,若出现菌落萎缩、变色或污染需立即重新活化;长期保存(1 年以上):采用 - 80℃甘油冷冻保存(20% 无菌甘油与对数期菌液按 1:1 体积混合,分装冻存管,避免反复冻融破坏菌株特性),或冻干保存(以 10% 脱脂乳为保护剂,冻干后置于 - 20℃以下干燥环境)。复苏时,将冻存菌液或冻干菌粉接入 BHI 肉汤,37℃振荡培养 12-16 小时(转速 180-200rpm),待菌液 OD600 值达 0.6-0.8(对数生长期,活菌数约 10^8 CFU/mL)后,转接固体培养基纯化,复苏后需通过生化反应验证(如不发酵山梨醇、VP 试验阳性),确保菌株特性未改变。
应用:在临床检测领域,作为霍氏肠杆菌分离鉴定的质控株,验证生化鉴定试剂盒(如 API 20E)、质谱检测平台的准确性,助力实验室区分霍氏肠杆菌与阴沟肠杆菌、产气肠杆菌;同时用于 AST 实验,校准头孢类、喹诺酮类等抗菌药物的抑菌圈直径或最低抑菌浓度(MIC),为临床用药提供参考;在医院感染防控中,用于环境监测(如病房物体表面、医疗器械)的阳性对照,评估清洁消毒效果。在食品检测领域,作为食品(如肉制品、乳制品)中肠杆菌污染检测的参考株,验证选择性培养基的性能;在科研领域,用于霍氏肠杆菌致病机制(如黏附宿主细胞、生物膜形成)研究,及新型抗菌药物体外活性评价。在教学领域,用于微生物学实验,演示肠杆菌属菌种的形态、生化反应鉴别,帮助学习者掌握革兰氏阴性杆菌的分类特征。
安全:需在生物安全二级(BSL-2)实验室操作(因存在医院感染传播风险,且部分临床株耐药);涉及菌液移液、离心、平板涂布等可能产生气溶胶的操作,需在生物安全柜内进行,操作人员需佩戴无菌手套、口罩、护目镜,避免皮肤接触菌液或吸入气溶胶。实验后,所有污染耗材(培养皿、吸头、离心管、接种环)需经 121℃高压灭菌 30 分钟以上,实验台面用含氯消毒剂(有效氯 2000mg/L)擦拭消毒,再用 75% 乙醇二次消毒。菌株储存需单独存放于专用 BSL-2 实验室冰箱,冻存管清晰标注 “ATCC 700323 霍氏肠杆菌 - 非耐药株”、保存日期及操作人员,严禁与耐药菌株或致病性肠杆菌(如产毒大肠杆菌)混合存放,防止交叉污染与耐药基因扩散。


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