形态与生化：菌体呈短杆状或球杆状，大小（0.3-0.6）μm×（1.0-2.2）μm，两端钝圆，无芽孢，无鞭毛（无运动性），常单个、成对或短链排列，部分菌株可观察到薄荚膜（需经荚膜染色确认）。最适生长温度 35-37℃，兼性厌氧（含 5%-10% CO₂环境可显著促进生长，提升菌落饱满度与生化反应稳定性），适宜 pH 7.2-7.8；核心生长依赖 X 因子（氯化血红素）与 V 因子（NAD），仅能在含双因子的培养基中繁殖（与副流感嗜血杆菌等 “需 V 因子无需 X 因子” 菌种的核心区分点）；生化特征稳定：发酵葡萄糖、半乳糖产酸（不产气），不发酵乳糖、蔗糖、甘露醇，氧化酶阳性，触酶阳性，硝酸盐还原试验阳性，吲哚试验阴性，尿素酶试验阴性，这些特性是菌株精准鉴别的核心依据。
致病性相关：属于条件致病菌，主要定植于人类鼻咽部，是儿童、老年人及免疫缺陷人群感染的重要病原体；该菌株为荚膜 a 型（Haemophilus influenzae type a, Hia） ，虽致病性略低于 b 型（Hib），但仍可引发肺炎、脑膜炎、败血症等侵袭性疾病，近年来在儿童群体中感染率呈上升趋势。ATCC 49247 携带黏附素（如 Hap 蛋白）、脂多糖（LPS）等毒力因子，且对部分 β- 内酰胺类药物存在敏感性差异，主要用于流感嗜血杆菌血清型致病机制研究、耐药基因筛查及临床侵袭性感染检测的阳性对照。
培养：需双因子营养支持与适宜 CO₂环境，推荐使用含 5%-10% CO₂的培养箱。推荐培养基包括：巧克力琼脂（通过加热绵羊血释放 X、V 因子，用于活化与纯培养，菌落呈圆形、半透明至乳白色，直径 0.5-1.2mm，边缘整齐，质地柔软，培养 24-48 小时后表面光滑有光泽）、嗜血杆菌选择性琼脂（巧克力琼脂基础上添加万古霉素、多粘菌素 B 等，抑制革兰氏阳性菌与杂菌，适用于临床标本分离）、脑心浸液肉汤（添加 X/V 因子，用于增菌，37℃ CO₂振荡培养 18-24 小时菌液呈中度浑浊，OD600 值约 0.4-0.6）。培养时需避免温度低于 32℃或高于 38℃，防止生长停滞；CO₂浓度波动需控制在 ±2% 以内，避免影响荚膜形成与药敏特性。
保存：短期保存（1-2 周）：将纯菌株接种巧克力琼脂斜面，37℃ CO₂培养 24 小时后密封管口，4℃冰箱冷藏，每 3-4 天观察 1 次（因菌株对营养需求高，低温易失活），出现菌落萎缩或污染需立即重新活化；长期保存（1 年以上）：采用 - 80℃甘油冷冻保存（20% 无菌甘油与对数期菌液 1:1 混合，菌液需取自新鲜双因子肉汤，分装冻存管，避免反复冻融），或冻干保存（以 10% 脱脂乳 + 0.1% V 因子为保护剂，冻干后 - 20℃以下干燥存放）。复苏时，将冻存菌液 / 冻干菌粉接入含双因子的脑心浸液肉汤，37℃ CO₂振荡培养 18-24 小时，待菌液浑浊后转接巧克力琼脂纯化，复苏后需通过 “双因子需求试验”（分别验证 X、V 因子依赖性）与血清型鉴定（如乳胶凝集试验），确保菌株特性未改变。
应用：在临床检测领域，作为 AST 实验的质控株，用于校准氨苄西林、头孢曲松等抗菌药物的抑菌圈直径或最低抑菌浓度（MIC），验证药敏方法（纸片扩散法、肉汤稀释法）的准确性，为临床用药提供可靠参考；在耐药研究领域，用于流感嗜血杆菌 β- 内酰胺酶基因（如 blaTEM）检测、耐药机制（如青霉素结合蛋白突变）分析，及耐药检测试剂盒（如实时荧光 PCR 试剂盒）的性能验证；在血清学研究领域，用于流感嗜血杆菌 a 型荚膜多糖提取、抗原性分析，及 a 型特异性抗体检测方法的建立；在教学领域，用于演示 “细菌营养需求差异”“血清型鉴定” 等实验，帮助学习者掌握嗜血杆菌属特性与临床检测核心技术。
安全：需在生物安全二级（BSL-2）实验室操作（因可引发侵袭性感染且存在耐药风险）；涉及菌液移液、离心、平板涂布等可能产生气溶胶的操作，需在生物安全柜内进行，操作人员需佩戴无菌手套、口罩、护目镜，避免皮肤接触菌液或吸入气溶胶；实验后，污染耗材（培养皿、吸头、离心管）需 121℃高压灭菌 30 分钟以上，实验台面用含氯消毒剂（有效氯 1000mg/L）擦拭后，再用 75% 乙醇二次消毒；菌株储存需单独存放于专用 - 80℃冰箱，冻存管清晰标注 “ATCC 49247 流感嗜血杆菌（a 型荚膜）- 致病菌”、保存日期及耐药信息，严禁与其他血清型流感嗜血杆菌或呼吸道病原体混合存放，防止交叉污染与耐药基因扩散。
客服1