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ATCC27853铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa WDCM 00025

ATCC 27853 铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)产品说明一、菌株基本信息ATCC 27853 是美国典型培养物保藏中心(ATCC)收录的标准铜绿假单胞菌菌株,获世界微生物菌种保藏中心联合会(WDCM)编号 WDCM 00025,属变形菌门假单胞菌科假单胞菌属,为革兰氏阴性需氧杆菌。其生物学特性经国际标准化组织(ISO)及临床实验室

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ATCC 27853 铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)产品说明
一、菌株基本信息
ATCC 27853 是美国典型培养物保藏中心(ATCC)收录的标准铜绿假单胞菌菌株,获世界微生物菌种保藏中心联合会(WDCM)编号 WDCM 00025,属变形菌门假单胞菌科假单胞菌属,为革兰氏阴性需氧杆菌。其生物学特性经国际标准化组织(ISO)及临床实验室标准化协会(CLSI)认证,是全球临床抗菌药物敏感性试验(AST)的 “金标准” 参考株,广泛用于医院感染诊断质控、抗生素体外活性校准及检测试剂性能验证,在临床医学(感染防控)、微生物检测标准化及药物研发领域实用价值无可替代。
二、核心特性
菌体呈直杆状或微弯曲,直径 0.5-1.0μm、长 1.5-5.0μm,无芽孢,具 1-3 根极生鞭毛(运动性强,显微镜下呈活泼穿梭状运动),部分菌株有薄荚膜,革兰氏染色阴性(严格控制脱色时间 10-15 秒,避免因细胞壁结构特性导致假阳性)。最适生长温度 35℃,可在 42℃生长(与假单胞菌属其他菌种如荧光假单胞菌的核心鉴别点),专性需氧,营养需求极低,在普通培养基、甚至含低浓度抗生素的培养基中仍可生长;不发酵葡萄糖(通过氧化途径利用葡萄糖产酸,O/F 试验呈氧化型),氧化酶阳性(滴加 1% 二甲基对苯二胺试剂后 5-10 秒内呈深紫色,反应迅速),触酶阳性,能稳定产生绿脓素(使培养基呈蓝绿色)和荧光素(紫外灯下显黄绿色荧光,为该菌标志性代谢特征),可分解尿素、不分解乳糖,生化反应高度标准化,CLSI 明确将其生化表型作为铜绿假单胞菌鉴定的 “参照模板”,能与假单胞菌属所有近缘菌种精准区分。
属医院感染高风险条件致病菌,广泛存在于医院环境(如呼吸机管路、导尿管、烧伤创面敷料)及自然环境(土壤、水体)中,尤其易感染免疫缺陷人群(如肿瘤患者、ICU 患者、烧伤患者),可引发肺炎、尿路感染、败血症及烧伤创面感染等严重疾病;其对多种抗生素的固有敏感性已被 CLSI 明确界定(如对碳青霉烯类、头孢类、氨基糖苷类敏感),无天然耐药性,是验证临床分离株耐药表型的 “基准对照”。该菌株携带 lasR/rhlR 群体感应调控系统、exoU/exoY 毒力基因(毒力表型稳定可控),且基因组序列已完全解析,是研究铜绿假单胞菌致病机制与耐药进化的理想模式株。
三、培养与保存
需严格遵循标准化培养流程,推荐使用:cetrimide 琼脂(选择性培养基,含十六烷基三甲基溴化铵,抑制杂菌同时促进绿脓素产生,菌落呈典型蓝绿色,直径 1.5-2.0mm)、营养琼脂(观察菌落形态,圆形、边缘不整齐、表面湿润有金属光泽,培养 24 小时后色素特征最明显)、Mueller-Hinton(MH)琼脂(AST 专用培养基,需确保培养基厚度 4±0.5mm,保证药敏结果重复性)。35℃需氧培养 18-24 小时,活菌数稳定维持在 10^8-10^9 CFU/mL,且菌落形态、色素产量及生化特性无批次差异。短期保存需将 MH 琼脂斜面菌株置于 4℃密封冷藏(1-2 周,避免反复冻融导致菌体活性波动),长期保存需采用 - 80℃甘油冷冻法(20% 无菌甘油 + MH 肉汤保护剂,梯度降温至 - 80℃,减少冰晶对菌体损伤)或冻干保存(1 年以上,冻干后置于 - 20℃以下干燥避光环境,密封防吸潮,复苏后活菌回收率需≥90%);复苏后必须通过三项关键验证:①绿脓素与荧光素产生(确保代谢表型正常)、②氧化酶试验(验证生化特性)、③对头孢他啶的敏感性(MIC 值需符合 CLSI 标准范围,确保药敏基准地位)。
四、应用与安全
应用上,其核心价值在于 AST 标准化:①作为 CLSI、EUCAST(欧洲抗菌药物敏感性试验委员会)推荐的 “药敏质控金标准”,用于校准碳青霉烯类(亚胺培南 MIC 1-4μg/mL)、头孢类(头孢他啶 MIC 0.5-2μg/mL)、氨基糖苷类(阿米卡星 MIC 2-8μg/mL)等 10 余类抗生素的 MIC 判读范围,确保全球临床实验室药敏结果可比;②用于验证 AST 检测试剂(如药敏纸片、自动化药敏仪)的准确性,是试剂上市前注册审批的强制对照株;③辅助区分临床分离株的 “固有耐药” 与 “获得性耐药”,为耐药机制研究提供基准参照。安全方面,属医院感染重点防控致病菌,需在 BSL-2 实验室操作,气溶胶相关操作(如菌液稀释、平板涂布)必须在二级生物安全柜内进行,操作人员需佩戴 N95 口罩、防护服及无菌手套;污染耗材需 121℃高压灭菌 60 分钟(含菌株的废液需先加 1% 含氯消毒剂处理 30 分钟,确保菌体完全灭活);菌株需单独存放于双锁生物安全冰箱,标注 “ATCC 27853 铜绿假单胞菌(WDCM 00025)- AST 国际标准株,医院感染高风险致病菌” 警示信息,且需建立菌株领用、使用、销毁的全流程台账,严防实验室感染及菌株滥用。


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