ATCC 35030 log8 阴沟肠杆菌亚种阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae subsp. Cloacae)产品说明
一、菌株核心价值(适配实际场景)
作为肠杆菌科标准菌株,核心优势是稳定的多重耐药潜力、广谱环境适应性及 log8(约 10⁸ CFU / 单位)超高浓度质控能力,适配《临床实验室标准化协会(CLSI)抗菌药物敏感性试验标准》及《医院感染监测规范》,常作为临床多重耐药菌(MDR)研究的阳性对照 —— 可模拟 ICU、新生儿科等场景的高浓度阴沟肠杆菌污染(如呼吸机相关性肺炎、尿路感染),用于碳青霉烯类、头孢菌素类药物的体外抑菌测试。与 NCTC6017(沙门氏菌,宿主针对性强)不同,该菌株无宿主特异性,能适应食品加工、医疗环境等多场景,可评估消毒产品对高浓度肠杆菌科细菌的杀灭效果,通过消毒前后 log8 浓度下降≥6 log 判定达标,填补沙门氏菌在超高浓度肠杆菌科质控中的空白。
二、培养与复苏要点
推荐麦康凯琼脂(MAC),菌落呈粉红色、圆形光滑(与 NCTC6017 无色半透明菌落鉴别),兼性厌氧培养(湿度 60%-70%,与 NCTC6017 一致)。冻干菌粉用胰酪大豆胨肉汤(TSB)溶解,37℃振荡培养(200rpm)20-24 小时(log8 超高浓度需延长增殖时间,比 NCTC6017 多 2-4 小时)。浓度校准采用 10 倍梯度稀释至 10⁻⁷、10⁻⁸,取 0.1mL 涂布 MAC 平板,37℃培养 24 小时计数,误差超 ±0.2 log 需排查振荡转速不足(低于 200rpm 易导致菌体沉降)或稀释吸管交叉污染。生化验证:发酵乳糖产酸产气(与 NCTC6017 一致)、VP 试验阳性(与 NCTC6017 阴性鉴别)、吲哚试验阴性(与部分沙门氏菌阳性鉴别),革兰氏染色呈阴性短杆状(同属肠杆菌科,形态相近)。
三、安全管控与存储
属 BSL-2 级菌(条件致病,可引发免疫低下人群败血症、医院获得性感染,与 NCTC6017 管控等级一致,但耐药风险更高),需在生物安全柜内操作,人员穿全包裹式防护服、戴 N95 口罩及护目镜(避免吸入超高浓度菌雾)。含菌培养物 121℃高压灭菌 35 分钟(比 NCTC6017 延长 5 分钟,确保彻底灭活高浓度菌体及耐药基因载体)。长期保存选冻干法(含 15% 脱脂乳 - 8% 蔗糖保护剂,增强高浓度菌体稳定性),4℃干燥避光存放,保质期 3-4 年;-80℃冷冻需将对数期菌液与 50% 无菌甘油按 1:1 混合(甘油终浓度 25%),避免反复冻融(影响耐药表型稳定性)。存双锁生物安全冰箱,标签注明 “阴沟肠杆菌(ATCC35030,亚种 Cloacae)log8 浓度”,实行双人双锁领用制度,领用记录需额外注明 “耐药菌研究” 或 “高浓度消毒验证” 用途,严防泄漏引发多重耐药菌扩散风险。


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