ATCC 19404 产孢梭菌（Clostridium sporogenes）WDCM 00008 产品说明
一、菌株核心价值（适配实际场景）
作为获 WDCM 00008 认证的国际标准厌氧芽孢杆菌菌株，核心优势是稳定芽孢形成能力、非致病性（不产毒素）、严格厌氧特性及国际溯源性，适配《消毒技术规范》《食品商业无菌检验标准》及欧盟 EN 13610 标准，是厌氧环境消毒验证、食品杀菌工艺质控及跨国实验室质量比对的关键安全指示菌。与 ATCC11437（非 WDCM 认证）相比，其 WDCM 认证确保检测结果可国际互认，更适用于进出口食品企业、跨国医疗设备厂商的质控场景；与产气荚膜梭菌（产毒致病）不同，非致病性使其可安全用于食品、药品无菌测试，模拟肠道、密闭包装等厌氧场景，评估过氧乙酸、二氧化氯等消毒剂对芽孢的杀灭效果（需下降≥4 log）；也用于食品罐头热加工工艺验证（121℃高压灭菌 20 分钟可杀灭芽孢），还可作为厌氧培养体系（厌氧箱、厌氧袋）适用性验证的标准株，填补致病性厌氧菌在安全质控中的空白。
二、培养与复苏要点
推荐庖肉培养基或硫乙醇酸盐流体培养基（无需额外营养补充），菌落呈灰白色、圆形凸起，表面光滑，血琼脂平板（厌氧培养）无溶血环（与产气荚膜梭菌双层溶血环鉴别，特性与 ATCC11437 一致）；液体培养时培养基浑浊并产生气体，使庖肉培养基中碎牛肉渣上浮。培养条件：温度 37℃±1℃，厌氧环境需通过厌氧箱通入 90% 氮气 + 5% 氢气 + 5% 二氧化碳混合气体，控制氧浓度＜0.1%；芽孢复苏需 48-72 小时，繁殖体培养 24-48 小时即可达到对数期。复苏步骤：取冻干芽孢粉，加入 2mL 无菌硫乙醇酸盐流体培养基，轻轻混匀后置于厌氧箱预培养 24 小时活化芽孢；随后接种至庖肉培养基，37℃厌氧培养 48 小时；取菌液涂布血琼脂平板，厌氧培养 48 小时后挑取单菌落纯化，最终制得浓度为 10⁷-10⁸ CFU/mL 的芽孢悬液。浓度校准采用涂布计数法，误差需控制在 ±0.2 log 内；形态鉴别为革兰氏阳性粗大杆菌（直径 1-1.2μm，长度 3-4μm），椭圆形芽孢位于菌体次末端且不膨大；生化特性为发酵葡萄糖、蔗糖产酸产气，不发酵乳糖，明胶液化试验阳性、硫化氢试验阴性（与产气荚膜梭菌鉴别，与 ATCC11437 生化特性一致）。
三、安全管控与存储
属 BSL-1 级菌（非致病），常规超净台即可满足操作需求，个人防护仅需佩戴无菌手套、一次性口罩及实验服，无需穿防护服（与 BSL-2 级产气荚膜梭菌管控差异显著）。环境消毒：实验结束后，用 0.5% 过氧乙酸擦拭超净台台面及实验器具，开启紫外灯照射 30 分钟；若发生芽孢悬液泄漏，用浸有 0.5% 过氧乙酸的纱布覆盖 30 分钟后清理。废弃物处理：含菌培养物（如培养基、芽孢悬液）需 121℃高压灭菌 30 分钟（比产气荚膜梭菌短 30 分钟，无需额外延长灭菌时间）；实验耗材灭菌后按普通废弃物处理，无需按医疗有害废弃物分类。存储推荐沙土管法（取灭菌沙土与芽孢悬液混合，室温干燥后密封，4℃冷藏存放，保质期 5-8 年，芽孢存活率≥85%）；也可采用 - 80℃甘油冷冻法（将芽孢悬液与 50% 无菌甘油按 1:1 混合，分装冻存，保质期 3-4 年）；短期存储可将纯化菌落接种至庖肉培养基，培养 48 小时后用石蜡油封口，4℃冷藏存放 1-2 个月。需单独存放于双锁冰箱的厌氧菌专属区域，与需氧菌严格分区；标签注明 “产孢梭菌（ATCC19404，WDCM 00008）”“非产毒”“存储日期”，建立常规领用台账，管理难度低于 ATCC11437（因 WDCM 认证菌株特性更稳定，质控更便捷）。
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