生物安全与来源：生物安全等级为 1 级（BSL-1），虽携带 β- 内酰胺酶编码基因，但无致病性，属于非致病肠道菌株，常规实验室规范操作（超净台接种、无菌耗材使用、操作后器具灭菌）下，对操作人员及环境无危害。该菌株分离自临床非感染性肠道样本，经长期验证，其产酶特性（稳定产生 TEM 型 β- 内酰胺酶）从未漂移，能精准模拟临床常见产酶耐药大肠杆菌的药敏表型，是连接耐药检测与临床用药的核心参照。
形态与培养特性：属于革兰氏阴性短杆菌，具有肠杆菌科典型形态与高适应性培养特征：
显微镜形态：菌体呈短杆状，直径 0.5-1.0μm，长度 1.0-2.0μm，常单个或成对排列，无芽孢，具有周生鞭毛（运动能力均一，鞭毛染色后形态稳定），革兰氏染色呈均匀红色（无着色不均，区别于其他革兰氏阴性杆菌）；
培养要求：对营养需求极低，在普通营养琼脂（NA）、胰酪大豆琼脂（TSA）、麦康凯琼脂、伊红美蓝琼脂（EMB）及 LB 琼脂中均能快速生长；兼性厌氧，最适生长温度 37℃（与人体体温适配），可耐受 10-45℃温度范围，生长速度稳定（37℃培养 16-18 小时菌落直径达 2-3mm），无延迟生长期，确保实验结果重复性；
菌落形态：在 TSA 平板上，形成圆形、表面光滑湿润、边缘整齐、乳白色不透明菌落（直径 2-3mm，大小均一）；在麦康凯琼脂上，因发酵乳糖产酸，菌落呈鲜艳粉红色（无颜色差异）；在 EMB 琼脂上，菌落呈紫黑色且带有清晰金属光泽（标志性特征）；在含氨苄西林（10μg/mL）的选择性培养基上，能正常生长（产酶耐药特性直观体现），而敏感菌株（如 ATCC25922）则无法生长，可快速区分产酶与非产酶菌株。
生化与耐药特性：生化反应具有 “标准化” 稳定性，与非耐药大肠杆菌一致：能发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇等糖类产酸产气（发酵速度与产气量均一）；触酶试验阳性、氧化酶试验阴性；吲哚试验阳性、甲基红试验阳性、V-P 试验阴性、柠檬酸盐利用试验阴性（IMViC 试验结果 “++--”，无变异）；不产生硫化氢，不分解尿素。核心优势在于稳定的产酶耐药表型：经 CLSI 标定，该菌株稳定产生 TEM 型 β- 内酰胺酶，对青霉素类（氨苄西林、青霉素 G）耐药（MIC≥32μg/mL），对头孢类（头孢唑林）中度敏感，对含酶抑制剂复方制剂（阿莫西林 / 克拉维酸）敏感（MIC≤0.5/0.25μg/mL），每种药物的 MIC 值均有明确标准范围，是 β- 内酰胺类药物耐药检测的 “基准标尺”。
未开封状态：产品主要以冻干粉（真空密封包装，含 10^7-10^8 CFU / 支活菌，含产酶保护剂） 或标准化甘油菌悬液（20% 甘油，10^6 CFU/mL，-80℃专用） 形式供应：
冻干粉：未开封时需置于 - 20℃以下冷冻保存，长期储存（超过 1 年）建议放入 - 80℃冰箱，严禁反复冻融（反复冻融会使活菌率下降 60% 以上，破坏产酶稳定性）；保质期以 ATCC 官方标注为准，通常为 5 年（专用保护剂可维持产酶基因稳定）；
甘油菌悬液：未开封时需直接置于 - 80℃冷冻保存，不可室温或冷藏放置，保质期 2 年；解冻时需 37℃水浴快速溶解（1 分钟内），解冻后需一次性使用，剩余菌液需灭菌后丢弃，不可再次冷冻（避免产酶特性改变）。
复苏后状态：复苏后的菌液（TSB 肉汤培养）需 2-8℃冷藏保存，建议 5 天内使用完毕（代谢稳定，冷藏期略长于普通菌株）；复苏后的斜面培养物（TSA 斜面）需 2-8℃冷藏保存，建议 2 周内传代一次，传代时需使用无抗菌药物的新鲜培养基（避免药物诱导产酶量变化）；使用前需通过涂片镜检（确认菌体形态正常）及药敏预实验（验证对氨苄西林耐药、对阿莫西林 / 克拉维酸敏感的表型），确保产酶特性无漂移。
复苏操作：
冻干粉复苏：无菌环境下（超净台内），向冻干粉中加入 1mL 无菌胰酪大豆肉汤（TSB，无抗菌药物污染），轻轻吹吸 5 次使粉末完全溶解，转移至无菌试管，37℃培养箱振荡培养（180rpm）14-16 小时；待菌液 OD600 值达 0.5-0.7（对数生长期中期，产酶量最稳定）、镜检可见均一短杆菌时，即可用于实验；
甘油菌复苏：从 - 80℃取出后立即 37℃水浴解冻，用无菌枪头吸取 100μL 菌液接种至 5mL TSB 肉汤，37℃振荡培养 14-16 小时，待菌液浑浊后使用，无需再次稀释（浓度已标准化，适配药敏实验需求）。
传代培养：在超净台内，用无菌接种环蘸取少量复苏菌液，在 TSA 平板上分区划线（确保单菌落分离），37℃培养 16-18 小时；挑取形态典型（圆形、乳白色、光滑）的单菌落，可直接用于 AST 实验，或转接至 TSA 斜面（37℃培养 20 小时），2-8℃冷藏保存；传代次数严格控制在 3 代以内（避免长期传代导致产酶基因丢失），每次传代后需通过氨苄西林耐药实验验证产酶特性，确保菌株质量。
应用操作：
临床耐药 AST 质控：作为 CLSI 推荐的 “β- 内酰胺类药物耐药质控菌株”，用于验证全自动药敏分析仪（VITEK 2、BD Phoenix）、药敏试纸条、微量肉汤稀释法对产酶耐药大肠杆菌的检测准确性，如确认氨苄西林 MIC 值在 32-128μg/mL、阿莫西林 / 克拉维酸 MIC 值在 0.25/0.125-1/0.5μg/mL，偏离则需校准设备或更换试剂，是临床区分产酶与非产酶菌株、指导 β- 内酰胺类药物使用的 “把关菌株”；
产酶菌株鉴定验证：作为阳性对照，验证 β- 内酰胺酶检测试剂盒（如头孢硝噻吩纸片法）、质谱耐药表型分析系统的准确性，确保临床样本中产酶耐药大肠杆菌的正确鉴定，避免误判导致的用药失误；
抗耐药药物筛选：在科研领域，用于筛选针对产 β- 内酰胺酶大肠杆菌的新型药物（如新型酶抑制剂、抗菌肽），通过对比药物对该菌株与敏感菌株（ATCC25922）的抑制效果，评估药物抗耐药活性；
教学与方法验证：在微生物教学中，用于演示耐药菌株的药敏实验操作，对比敏感与耐药菌株的药敏结果差异；同时可用于实验室新耐药检测方法（如分子生物学检测 β- 内酰胺酶基因）的验证，确保方法特异性与灵敏度。
客服1