ATCC 27736 肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）产品简介
一、产品名称
二、产品特点
生物安全与来源：生物安全等级为 2 级（BSL-2），具社区感染与肠道定植双重倾向性，广泛存在于健康人群肠道（定植率约 10%-15%）及社区环境（如饮用水、食物表面），免疫力短暂下降人群（如感冒、疲劳者）易发生肠道定植移位引发社区感染，极少引发医院获得性重症感染（区别于 ATCC23357），操作需在生物安全柜内进行，器具使用后需 121℃高压灭菌 30 分钟。菌株分离自健康人群粪便样本，生物学特性与社区获得性肺炎克雷伯菌分离株及肠道定植株高度一致，其耐受肠道低 pH 环境、黏附肠道上皮细胞的能力显著，可模拟 “肠道定植 - 移位感染 - 社区传播” 的典型过程，是研究社区肺炎克雷伯菌感染与肠道微生态关联的理想模型。
形态与培养特性：革兰氏阴性短杆菌，具肠道菌株特有的形态适应性与培养兼容性：
显微镜形态：菌体呈短杆状（0.4-0.9μm×1.4-2.2μm），大小略小于 ATCC23357，单个或短链排列（呈 “双球状” 聚集的比例仅 15%-25%，低于 ATCC23357，适配肠道菌群分散定植特征），无芽孢，无鞭毛（动力试验 100% 阴性，与其他肺炎克雷伯菌一致），革兰氏染色呈均匀深红色（染色稳定性高，25-55 秒内不易脱色，适配粪便样本等复杂社区样本染色操作），荚膜染色可见薄荚膜（荚膜厚度约 0.3-0.7μm，薄于 ATCC23357 与 ATCC13883，荚膜多糖含肠道黏附相关修饰，是增强肠道定植能力的关键结构）；
培养要求：兼性厌氧，耐受肠道低氧与宽 pH 环境（在 pH 5.5-8.0 范围内均可生长，适配肠道 pH 波动特征），最适培养基为麦康凯琼脂、SS 琼脂（肠道菌选择性培养基）及营养琼脂，最适温度 35-37℃（温度波动 ±1.5℃时，生长速率变化≤10%，适配社区医疗实验室培养条件差异），生长速度中等（18-24 小时形成清晰菌落，适配社区感染快速检测需求），核心特征为肠道菌筛选适应性（在 SS 琼脂上形成红色、中心不透明的菌落，抑制肠道常见沙门氏菌、志贺氏菌等致病菌，可快速从粪便样本中分离）；
菌落形态：麦康凯琼脂上呈圆形、表面光滑湿润且边缘规则的粉红色菌落（直径 1.0-1.6mm，小于 ATCC23357），质地柔软（因生物膜基质分泌量低，较 ATCC23357 更易挑取），挑取时拉丝长度稳定在 1.2-2.8cm（拉丝长度短于 ATCC23357 与 ATCC13883，是社区株与医院耐药株的肉眼鉴别点之一），菌落表面具中等光泽（光泽度介于 ATCC23357 与 ATCC13883 之间，因肠道适配外膜蛋白表达）；在 SS 琼脂上呈红色、中心略深的菌落，无溶血现象（接种绵羊血琼脂无溶血环，区别于社区常见的溶血性链球菌）；菌落易与其他社区肠杆菌科菌株混淆，需通过肠道培养基生长能力、拉丝长度及生化反应进一步确认属性。
生化与药敏特性：生化反应具社区株与肠道株双重标识，药敏谱符合社区获得性感染治疗需求：
生化特性：氧化酶阴性、触酶阳性（阳性反应时间稳定在 10-22 秒，无延迟反应），发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇产酸产气（发酵甘露醇能力强于 ATCC23357，是社区株与医院株的核心生化鉴别点），不发酵麦芽糖、肌醇，对山梨醇完全不发酵（区别于 ATCC23357 的山梨醇弱阳性，符合肠道定植株生化特征），VP 试验阳性（反应强度弱于 ATCC23357），甲基红试验阴性，枸橼酸盐利用试验阳性（48 小时内 95% 阳性，偶见延迟阳性，符合社区株生化变异特征），生化结果符合社区获得性肺炎克雷伯菌与肠道定植株特征，可作为社区医疗生化鉴定卡性能验证的关键菌株；
药敏特性：核心优势在于社区用药适配药敏谱，无 ESBLs 及其他耐药基因携带（区别于 ATCC23357），仅对青霉素类（氨苄西林）天然耐药（MIC≥32μg/mL，耐药浓度低于 ATCC23357），对社区常用抗菌药物（头孢曲松、左氧氟沙星、阿莫西林 / 克拉维酸、复方新诺明）均敏感，MIC 值高度标准化（头孢曲松 MIC 0.12-0.5μg/mL，左氧氟沙星 MIC 0.25-1μg/mL），药敏谱与社区获得性感染治疗响应高度匹配，同时其肠道黏附相关基因（如 fimH、mrkD 菌毛基因）表达稳定，是研究肺炎克雷伯菌肠道定植与社区感染关联机制的理想模型。
三、储存环境
未开封状态：以冻干粉（真空包装，含 10^7-10^8 CFU / 支，添加肠道菌株保护剂与荚膜稳定剂）或甘油菌悬液（20% 甘油，10^6 CFU/mL，-80℃专用）供应：
冻干粉：-20℃以下冷冻保存（可保存 2 年，长于 ATCC23357），长期（>2 年）建议置于 - 80℃±5℃储存（低温可更好维持肠道适配表型），严禁反复冻融（冻融次数≥3 次时，活菌率下降≥50%，但肠道黏附基因稳定性优于 ATCC23357），保质期 5 年（因社区株无耐药基因，表型稳定性高于医院耐药株，保质期与 ATCC13883 相当）；
甘油菌：直接 - 80℃±5℃保存（可在 - 20℃短期存放≤2 个月，活力下降≤15%，适配社区实验室储存条件），室温暴露 25 分钟致活力下降 40%（暴露耐受性优于 ATCC23357），保质期 3 年，解冻后可分装少量用于短期实验（适配社区实验室多次少量使用需求，无耐药基因交叉污染风险）。
复苏后状态：复苏菌液（营养肉汤，无需添加抗生素诱导）2-8℃冷藏 7 天内使用（7 天内药敏 MIC 值波动≤1 个稀释度，肠道黏附能力稳定）；斜面培养物（营养琼脂斜面）2-8℃冷藏 4 周内传代（传代间隔≥7 天时，表型稳定性最佳），传代无需特殊环境，使用前需通过三项关键指标验证：①镜检确认菌体大小均一性（变异系数≤10%）；②甘露醇发酵试验（阳性）与山梨醇发酵试验（阴性）；③头孢曲松药敏 MIC 值（0.12-0.5μg/mL），确保表型未漂移，符合社区株要求。
四、使用方法
复苏操作：生物安全柜内，冻干粉加 1mL 营养肉汤溶解，37℃±0.5℃恒温培养箱静态培养 18-24 小时；待菌液 OD600 值稳定在 0.7-0.8（吸光度变异系数≤5%）、镜检见短杆状菌体，且接种麦康凯琼脂形成粉红色菌落、SS 琼脂形成红色菌落时，通过甘露醇发酵试验确认特性后使用（复苏流程简单，无需耐药诱导，复苏成功率≥98%，适配社区医疗实验室操作）。
传代培养：挑取麦康凯琼脂上的粉红色单菌落（选择形态典型的菌落，避免挑取变异菌落），划线接种新鲜麦康凯琼脂平板（或 SS 琼脂平板），37℃±0.5℃培养 18-24 小时；斜面保存后 2-8℃冷藏，传代≤6 代（社区株表型稳定，传代次数多于 ATCC23357），每次传代后需进行 “形态 - 生化 - 药敏” 三重验证：①革兰氏染色确认染色稳定性；②甘露醇与山梨醇发酵试验确认生化一致性；③头孢曲松与氨苄西林药敏确认耐药谱稳定性，确保菌株始终符合社区获得性肺炎克雷伯菌属性。
应用操作：
社区感染质控：用于社区卫生服务中心、乡镇医院等基层医疗机构的呼吸道样本（咽拭子、痰液）、泌尿道样本（尿液）及肠道样本（粪便）鉴定系统（基层专用快速生化卡、胶体金抗原试纸）的性能验证，确保社区样本中肺炎克雷伯菌的快速准确检出，避免与医院耐药株混淆；
社区 AST 校准：校准社区常用 AST 试剂（如头孢曲松、左氧氟沙星药敏纸片）的 MIC 值，制定社区获得性肺炎克雷伯菌感染用药方案（如轻症感染优先选择口服阿莫西林 / 克拉维酸，重症选择注射用头孢曲松），适配基层医疗用药需求；
肠道微生态研究：用于肺炎克雷伯菌肠道定植机制研究（如与肠道益生菌的相互作用、肠道上皮细胞黏附实验），及抗生素对肠道肺炎克雷伯菌定植的影响研究，为社区感染预防与肠道微生态平衡维护提供理论依据；
基层教学培训：作为基层微生物实验室培训菌株，用于革兰氏染色、菌落形态观察、生化鉴定等基础操作教学，及 “社区获得性感染菌与医院获得性感染菌表型差异” 对比教学，提升基层医务人员对社区常见致病菌的识别能力。
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