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ATCC10240藤黄微球菌Micrococcus luteus

一、菌种基础信息中文名称:藤黄微球菌拉丁学名:Micrococcus luteus标准编号:ATCC10240产品形式:冻干粉(含海藻糖 - 脱脂乳 - 蔗糖复合保护剂,减少冻干对菌体的渗透压损伤与细胞膜破坏,维持色素合成能力,复苏率≥90%)安全等级:1 级(生物危害程度低,为人体皮肤、黏膜正常菌群,广泛存在于空气、土壤中,无致病性,

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一、菌种基础信息
  • 中文名称:藤黄微球菌

  • 拉丁学名Micrococcus luteus

  • 标准编号:ATCC10240

  • 产品形式:冻干粉(含海藻糖 - 脱脂乳 - 蔗糖复合保护剂,减少冻干对菌体的渗透压损伤与细胞膜破坏,维持色素合成能力,复苏率≥90%)

  • 安全等级:1 级(生物危害程度低,为人体皮肤、黏膜正常菌群,广泛存在于空气、土壤中,无致病性,适用于常规实验室质控、教学实验、工业酶制剂研发及环境监测场景,无需特殊生物安全防护)

  • 模式菌株:非模式菌株(是微球菌属中历史悠久、应用广泛的代表性菌株,因稳定的金黄色菌落、典型的革兰氏阳性球菌形态及高效的胞外酶分泌能力,成为微生物学研究与工业应用的经典参照菌株)

  • 分类地位:隶属于微球菌科、微球菌属,是环境中常见的非致病革兰氏阳性球菌,因能稳定合成藤黄菌素(lutein)呈现鲜明金黄色菌落而得名,在微生物分类鉴定、生化反应验证及工业生物催化领域具有不可替代的地位。

二、核心生物学特性
  1. 形态特征

  • 菌落形态:在营养琼脂培养基上 37℃培养 24h,菌落呈鲜亮的金黄色(色素浓度高于其他藤黄微球菌菌株),直径 1-2mm,表面光滑、凸起,边缘整齐,质地致密且有韧性,接种环挑取时不易破碎,色素稳定不扩散(区别于易褪色的其他产色素球菌);在血琼脂培养基上无溶血现象,菌落颜色更鲜艳,与周围红色培养基形成鲜明对比;

  • 菌体形态:革兰氏阳性球菌,直径 0.8-1.5μm,常呈不规则葡萄状或四联状排列(葡萄状聚集体松散度低于葡萄球菌,四联状排列更易观察),无芽孢,无鞭毛,不能运动,革兰氏染色后呈明亮的紫色球状聚集体,显微镜下形态特征显著,易与其他球菌区分。

  1. 生理特性

  • 专性好氧菌,最适生长温度 28-37℃(温度适应范围广,25℃低温环境下仍可正常生长,37℃时菌体繁殖速率最快),生长 pH 范围 6.0-8.5(耐碱能力较强,pH8.0 时生长速率下降不显著),耐盐性优异(可在含 5%-8% NaCl 的培养基中生长,高盐环境下色素合成不受影响);

  • 生化特性典型:能发酵葡萄糖、果糖产酸不产气,不发酵麦芽糖、乳糖、蔗糖,氧化酶试验阳性(10 秒内快速显色),触酶试验阳性(产生大量气泡),不分解尿素,能还原硝酸盐为亚硝酸盐,不产生吲哚;

  • 代谢优势:能高效分泌触酶、氧化酶及脂肪酶(脂肪酶活性可达 130U/mL,显著高于其他藤黄微球菌菌株),触酶稳定性强,在 40℃环境下仍保持 80% 以上活性,适合工业酶制剂生产;无致病性,不产生毒素,代谢过程中无有害次级产物,对人体皮肤、黏膜无刺激性;

  • 耐逆性强:在干燥环境中可存活 8 个月以上,对紫外线照射有一定耐受性,对青霉素、头孢类抗生素敏感性高,对四环素类抗生素耐受性中等。

三、培养与保存条件
  • 培养条件

  • 推荐使用营养琼脂培养基、哥伦比亚琼脂培养基或酶分泌专用培养基(含 0.5% 橄榄油、0.3% 酵母提取物,pH7.2),37℃有氧培养 24-30h(普通培养箱静置即可,充足氧气可促进色素合成与酶分泌,避免厌氧环境,否则菌体生长受抑制);

  • 液体培养选用营养肉汤培养基或酶分泌专用肉汤,37℃振荡培养(转速 180-200rpm)16-18h,菌体浓度可达 10⁹-10¹⁰CFU/mL,菌液呈淡黄色浑浊状(因菌体聚集成团,浑浊度低于分散生长的球菌,静置后无沉淀);

  • 若需诱导酶分泌,可在培养基中添加 0.1% 葡萄糖(作为碳源补充),培养 18h 后脂肪酶、触酶活性显著提升;若需观察菌落色素,建议在 28℃培养 48h,色素积累更充分。

  • 活化步骤

  • 无菌环境下(超净工作台内)开启冻干粉管,用 0.5-1mL 无菌营养肉汤培养基(预热至 37℃)充分溶解菌粉,将菌液全部接种至营养琼脂平板,37℃培养 24h;

  • 挑取单个典型金黄色菌落(优先选择颜色鲜亮、边缘整齐的菌落),转接至酶分泌专用肉汤,37℃振荡培养 16h,获得高活性种子液(操作简单,常规实验室环境即可完成,无需严格无菌防护)。

  • 保存方法

  • 未启封冻干粉:2-8℃密封避光保存,有效期 5 年(需保持干燥,潮湿环境易导致菌粉吸潮结块,影响复苏率);

  • 复苏后斜面菌种:4℃密封保存,每 2-3 个月继代一次,有效期 3 个月(频繁继代易导致酶活性下降,建议每次继代后验证触酶活性);

  • 长期保存:将对数生长期菌液与 30% 无菌甘油按 1:1 体积比混合(甘油浓度不可过高,避免损伤菌体),分装至冻存管后 - 80℃冷冻保存,或真空冷冻干燥后 - 20℃保存,有效期可达 5 年,严禁反复冻融(单次冻融活性损失≥20%,酶活性损失≤15%)。

四、主要应用领域
  1. 工业酶制剂研发与生产

  • 因高效分泌高活性触酶、脂肪酶,且酶稳定性强,广泛用于食品级触酶、工业级脂肪酶的研发与生产;食品加工中,触酶可用于去除乳制品、果汁中的过氧化氢(避免氧化褐变),脂肪酶可用于烘焙食品的风味改良(分解油脂产生芳香物质)及洗涤剂行业(低温环境下仍能有效分解油脂污渍);

  • 作为酶工程研究的宿主菌株,可通过基因工程手段优化酶分泌信号肽,进一步提升酶产量,符合 GB 2760-2024《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》中关于微生物酶制剂的使用要求。

  1. 微生物检测与质量控制

  • 作为微生物实验室的核心质控菌株,用于验证培养基(如营养琼脂、血琼脂、酶活性检测培养基)的适用性与无菌性,校准微生物计数方法(平板计数法、比浊法)的准确性;在食品、药品行业中,可作为环境微生物污染监测的指示菌株,评估生产环境(如酶制剂车间、食品加工车间)的洁净度,符合 GB 4789.2-2022《食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》的质控要求;

  • 作为抗菌药物敏感性试验的参照菌株,用于验证药敏试纸、药敏板的有效性,尤其适合基层实验室的日常质量控制。

  1. 环境监测与治理

  • 因耐盐性、耐干燥性强,可作为高盐环境(如腌制食品加工车间、盐湖周边土壤)、干燥环境(如仓储库房、沙漠土壤)微生物多样性监测的指示菌株,评估极端环境对微生物群落的影响;

  • 在环境治理领域,可作为土壤有机污染修复的伴生菌株,通过分泌脂肪酶降解土壤中的油脂类污染物,辅助改善污染土壤的微生物生态结构;同时可用于工业废水(如含油废水)的预处理,降低废水油脂含量,提升后续处理效率。

  1. 教学与科研实验

  • 作为微生物学基础教学的经典实验菌株,用于革兰氏染色、菌落形态观察、微生物计数、氧化酶 / 触酶试验、酶活性测定等实验,帮助学生掌握微生物基础操作技能与生化特性鉴别要点,其鲜明的金黄色菌落与典型的球菌形态能显著提升实验教学效果;

  • 在科研领域,可作为革兰氏阳性球菌代谢机制研究的模型菌株,探索色素合成途径(藤黄菌素生物合成基因调控)、酶分泌调控机制,为工业微生物改造提供理论基础;同时可用于微生物分类学研究,作为微球菌属的参照菌株,辅助未知球菌的分类鉴定。

五、质量与安全保障
  • 质量检测

  • 纯度检测:涂布营养琼脂、血琼脂平板及酶活性检测培养基,确保无杂菌污染(细菌、真菌),菌落呈典型金黄色且无溶血,显微镜下仅见革兰氏阳性球菌;

  • 活性检测:平板计数法测定活菌数,确保≥10⁸CFU / 支;37℃振荡培养 18h 后,菌体浓度≥10⁹CFU/mL;

  • 特性验证:通过 API Staph 生化鉴定卡(氧化酶阳性、触酶阳性、不发酵乳糖)、16S rRNA 基因测序确认分类地位,确保符Micrococcus luteus典型特征;

  • 酶活性检测:采用分光光度法测定触酶(≥150U/mL)、脂肪酶(≥120U/mL)活性,确保酶活性达标;

  • 随货附带完整 COA(分析报告),质量可追溯,关键指标(活菌数、酶活性、色素稳定性)均经过第三方检测验证。

  • 安全操作规范

  • 操作无需特殊生物安全防护,常规超净工作台即可完成;若进行大规模培养(如工业酶制剂生产),需注意通风,避免菌体气溶胶吸入(虽无致病性,但可能引发敏感人群呼吸道不适);

  • 实验废弃物(含菌培养基、耗材)需经 121℃高压蒸汽灭菌 30min 后处理;

  • 收货后 24 小时内,若发现安瓿管破损、菌粉变色(非淡黄色至金黄色)、复苏后菌落无金黄色特征或酶活性不达标,可立即联系售后办理退换货,售后团队将提供免费重新寄送服务。



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