中文名称:糠秕马拉色菌
拉丁学名:Malassezia furfur
标准编号:ATCC14521
产品形式:冻干酵母细胞粉(含脱脂乳 - 甘油 - 橄榄油复合保护剂,维持脂质依赖性酵母活性,复苏萌发率≥80%)
安全等级:2 级(条件致病性真菌,为人体皮肤正常菌群,免疫正常人群感染多表现为浅表皮肤病,免疫缺陷人群可能引发系统性感染,主要通过接触传播,需在生物安全二级实验室(BSL-2)按真菌操作规范处理)
模式菌株:非模式菌株(是马拉色菌属的代表性菌株,因典型的脂质依赖性生长特性、明确的临床致病性,成为皮肤真菌病诊断、抗真菌药物筛选及马拉色菌属分类研究的核心参照菌株)
分类地位:隶属于担子菌门、马拉色菌属,为专性嗜脂性酵母菌,自然定植于人类及温血动物皮肤表面(如胸背、头皮、腋窝等皮脂腺丰富区域),是临床浅表真菌病(如花斑癣、脂溢性皮炎)的主要致病菌,因能产生色素导致皮肤出现色素异常斑片而得名。
形态特征:
菌落形态:在含脂质的培养基(如添加橄榄油的沙堡弱培养基)上 30℃培养 7-14 天,菌落呈乳白色至淡黄色,直径 1-2mm,表面光滑、凸起,边缘整齐,质地黏稠,无明显色素扩散(区别于其他产色素真菌);菌落背面呈淡黄色,部分菌株因脂质代谢产物呈现轻微褐色;
菌体形态:典型的 “双相形态”—— 酵母相:圆形或椭圆形酵母细胞,大小 2-5μm×3-7μm,革兰氏染色阳性(真菌通用特性),乳酸酚棉蓝染色后呈蓝色,细胞壁较厚,可见出芽繁殖(多为单极出芽,芽颈较窄);菌丝相:少见(需特殊诱导条件),呈短棒状有隔菌丝,直径 1-2μm,仅在宿主皮肤角质层内或特定培养条件下出现;电镜下可见细胞表面光滑,无荚膜,胞内含有脂质颗粒(适应嗜脂性代谢)。
生理特性:
脂质依赖性生长:核心特性,无法在无外源脂质的培养基(如普通沙堡弱培养基)上生长,需添加橄榄油、菜籽油或吐温 - 80 等脂质物质才能正常繁殖,最适脂质浓度为 1%-2%(橄榄油);
专性好氧菌,最适生长温度 30-32℃(接近人体皮肤温度,利于定植),生长 pH 范围 5.0-7.0(偏酸性环境,匹配皮肤表面 pH),生长缓慢(培养周期 7-14 天,显著长于普通酵母菌);
生化特性特殊:不发酵糖类(区别于酿酒酵母等发酵型酵母菌),能分解脂质(如橄榄油、脂肪酸)作为碳源与能源,氧化酶试验阴性,触酶试验阳性,能产生脂酶(分解皮肤皮脂腺脂质的关键酶类);
致病性明确:通过黏附皮肤角质细胞、分泌脂酶分解皮脂腺脂质,产生刺激性代谢产物(如壬二酸、脂肪酸),引发皮肤炎症反应;临床常见疾病包括花斑癣(皮肤出现褐色或白色斑片)、脂溢性皮炎(头皮、面部油腻性脱屑)、马拉色菌毛囊炎(胸背红色丘疹),免疫缺陷人群(如艾滋病患者)可能引发系统性感染(如败血症);
耐药性特点:对常用抗真菌药物(如酮康唑、咪康唑、特比萘芬)敏感性较高,对两性霉素 B 敏感性中等,对青霉素、头孢类抗生素不敏感(真菌与细菌细胞壁结构差异导致)。
培养条件:
推荐使用脂质补充型培养基:如添加 1% 橄榄油的沙堡弱培养基(SDA-Olive)、马拉色菌专用培养基(含吐温 - 80、甘油三酯),30℃有氧培养 7-14 天(需避光培养,光照会抑制酵母细胞增殖);
液体培养:选用添加 0.5% 橄榄油的沙堡弱肉汤培养基,30℃振荡培养(转速 60-80rpm,低速避免酵母细胞破碎)10-12 天,菌体以酵母细胞团形式存在,培养液呈轻微浑浊状(因脂质漂浮,需定期摇匀);
关键培养要点:培养基需严格灭菌,脂质添加需在培养基灭菌后冷却至 50℃左右时加入(避免高温破坏脂质),培养环境需保持湿度 60%-70%(干燥环境易导致菌落干裂)。
活化步骤:
在 BSL-2 实验室生物安全柜内操作,无菌环境下开启冻干管,用 0.5-1mL 无菌脂质补充型肉汤(预热至 30℃,含 0.5% 橄榄油)充分溶解酵母细胞粉;
将菌液全部涂布于 SDA-Olive 平板,30℃培养 10 天,挑取菌落边缘新鲜酵母细胞(避免老化细胞),转接至新的 SDA-Olive 斜面,30℃培养 7 天,获得高活性纯培养物(操作时需戴无菌手套,避免酵母细胞通过皮肤接触传播)。
保存方法:
未启封冻干酵母细胞粉:4℃密封避光保存,有效期 3 年(需避免反复冻融,防止脂质成分氧化);
复苏后斜面菌种:4℃密封保存,每 1.5 个月继代一次,有效期 1 个月(频繁继代易导致脂质依赖性减弱,建议每次继代后验证生长特性);
长期保存:采用液氮冷冻保存(将酵母细胞与 10% 甘油 - 5% 橄榄油混合液分装,投入液氮)或低温冷冻保存(-80℃保存,添加 2% 橄榄油维持活性),有效期可达 2-3 年,解冻时需 37℃水浴快速融化,避免细胞损伤。
临床诊断与质控:
作为临床真菌实验室的标准参照菌株,用于验证马拉色菌检测方法(如直接镜检、真菌培养鉴定、PCR 分型)的准确性,评估诊断试剂(如马拉色菌抗原检测试纸、质谱鉴定数据库)的灵敏度;
用于临床分离株的比对分析,辅助确诊糠秕马拉色菌感染病例,区分其他马拉色菌属菌种(如限制性马拉色菌、球形马拉色菌)引起的皮肤疾病,符合 GB/T 19625-2005《动物布鲁氏菌病诊断技术》(延伸适用于皮肤真菌病诊断)及 CLSI M44-A2《酵母菌抗真菌药物敏感性试验标准》要求;
作为抗真菌药敏试验质控菌株,校准酮康唑、咪康唑等药物的敏感性检测结果,确保临床用药方案的合理性。
抗真菌药物与化妆品研发:
用于体外抗真菌药物筛选,评估新型抗真菌化合物(如植物源提取物、合成唑类药物)对酵母细胞生长的抑制效果,尤其针对脂质依赖性代谢途径的药物靶点(如脂酶抑制剂);
作为化妆品(如去屑洗发水、抗真菌面霜)功效评价菌株,测试产品对糠秕马拉色菌的抑制能力,验证去屑、控油效果,符合 QB/T 4343-2012《化妆品用原料 抗真菌剂抑真菌性能测试方法》要求;
研究药物作用机制:探索抗真菌药物对马拉色菌细胞膜(如麦角固醇合成)、脂酶活性的影响,为新型靶向药物研发提供实验基础。
医学与微生物学研究:
用于皮肤微生态研究,分析糠秕马拉色菌在健康人群与皮肤病患者皮肤表面的分布差异,探索皮肤菌群失衡与花斑癣、脂溢性皮炎的关联机制;
作为马拉色菌属分类研究的参照菌株,通过基因测序(如 ITS 序列、D1/D2 区域)对比不同马拉色菌菌种的进化关系,完善马拉色菌属分类体系;
研究致病性机制:探索酵母细胞黏附皮肤的分子机制(如黏附蛋白表达)、脂酶分泌调控规律,为皮肤真菌病的防控提供理论支撑。
教学与实验应用:
用于微生物学(真菌学方向)教学实验,观察嗜脂性酵母菌的形态特征、脂质依赖性生长特性,学习真菌培养与鉴定技术,帮助学生理解条件致病性真菌与人类皮肤健康的关系;
作为微生物实验课程的 “特殊真菌模型”,演示培养基成分(如脂质)对微生物生长的影响,培养学生对微生物营养需求的认知。
质量检测:
纯度检测:涂布 SDA-Olive 平板与普通 SDA 平板(验证脂质依赖性,普通 SDA 上不生长),确保无真菌杂菌与细菌污染,菌落形态均一,显微镜下仅见圆形 / 椭圆形酵母细胞;
活性检测:酵母细胞萌发率测定(SDA-Olive 平板培养 48h,萌发率≥80%),生长速率测定(30℃培养 10 天,菌落直径≥1mm);
特性验证:通过形态学鉴定(酵母相特征、出芽方式)、生化试验(触酶阳性、不发酵糖类)及 ITS 基因测序,确认菌株分类地位;
脂质依赖性验证:在无脂质培养基(普通 SDA)上培养 7 天,确认无生长,确保脂质依赖性特性稳定;
随货附带完整 COA(分析报告),质量可追溯。
安全操作规范:
操作需在 BSL-2 实验室进行,实验人员需经真菌安全培训,穿戴无菌手套、口罩、护目镜,全程在生物安全柜内处理(避免酵母细胞气溶胶吸入或皮肤接触);
实验废弃物(含菌培养基、耗材、防护用品)需经 121℃高压蒸汽灭菌 60min(真菌细胞耐高温,延长灭菌时间确保灭活)或用 5% 次氯酸钠浸泡 24h 后处理;
若发生菌液泄漏,立即用含氯消毒剂擦拭污染区域,通风 30 分钟以上,暴露人员需清洗皮肤,监测是否出现皮疹等感染症状;
收货后 24 小时内,若发现冻干管破损、酵母细胞粉变色(非乳白色)或复苏后在 SDA-Olive 平板上不生长 / 有杂菌污染,需在生物安全柜内妥善处理,并联系售后按致病性真菌运输规范办理退换货。


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