ATCC9144 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus WDCM 00035）产品说明
一、菌株基础信息
本品对应菌株为 ATCC9144 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus），隶属于葡萄球菌科葡萄球菌属，是经 ATCC（美国典型培养物保藏中心）、WDCM（世界微生物数据中心，编号 00035）通过基因测序（16S rRNA 及 nuc 毒力基因鉴定）、生化特征验证、产毒素能力检测及药敏试验等多维度标准化流程严格鉴定，并采用专业低温保藏技术留存的标准菌株。该菌株遗传背景清晰可追溯，经长期传代监测显示遗传特性稳定无变异，生物学特征（尤其是产金黄色色素、凝固酶阳性）具有高度可重复性，作为人类与动物常见致病菌，是微生物领域葡萄球菌致病机制研究、临床感染防控分析、诊断技术开发及抗菌药物敏感性试验的核心参照菌株。其专属保藏编号具备全球唯一性，可实现从菌株获取、实验操作到结果分析的全流程溯源，有效保障不同实验室、不同批次实验数据的精准比对，为金黄色葡萄球菌相关科研项目的严谨性与感染性疾病防控工作的可靠性提供关键技术支撑。
二、生物学特性
形态特征
该菌株为革兰氏阳性球菌，显微镜下呈圆形，直径约 0.8-1.2μm，典型排列方式为不规则葡萄串状（因分裂后菌体不立即分离），少数情况下呈单个、成双或短链状排列。无芽孢生成，不具备鞭毛结构，无法自主运动，部分菌株可形成薄荚膜（需通过荚膜染色法观察）。在普通营养琼脂培养基上培养后，形成的菌落呈典型金黄色，不透明状，质地厚实且表面光滑凸起，边缘整齐，直径约 1.0-2.5mm，菌落周围可产生溶血环（多数菌株为 β- 溶血）；在血琼脂培养基上，β- 溶血特性更为明显，菌落周围形成宽大、透明的溶血环（宽度 2-4mm），这一 “金黄色菌落 +β- 溶血” 的形态组合，是该菌株初步分离鉴定的核心依据（区别于表皮葡萄球菌的白色菌落、无溶血特性）。
生理生化特性
该菌株为兼性厌氧微生物，最适生长温度与人体体温一致，处于 35-37℃区间，最适 pH 值为 7.0-7.5，生长过程对营养要求不高，在普通营养琼脂、LB 培养基、TSB 培养基中均可良好生长，耐盐性较强（可在含 7.5%-10% 氯化钠的培养基中生长，这一特性可用于选择性分离）。生化反应试验中，触酶试验阳性（能分解过氧化氢产生氧气，区别于链球菌的触酶阴性），凝固酶试验阳性（能使兔血浆凝固，是区分致病性葡萄球菌与非致病性葡萄球菌的关键指标），氧化酶试验阴性，硝酸盐还原试验阳性，甲基红试验阳性，VP 试验阳性；糖类发酵方面，可发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖，发酵过程产酸不产气；不发酵阿拉伯糖、木糖、甘露醇（部分菌株可发酵甘露醇，需结合其他特性综合判断）。此外，该菌株可产生多种毒力因子，包括溶血毒素（α、β、γ、δ 毒素，引发溶血与组织损伤）、肠毒素（A-E 型，导致食物中毒）、表皮剥脱毒素（引发烫伤样皮肤综合征）、中毒性休克综合征毒素 - 1（TSST-1，引发中毒性休克综合征），同时具备较强的黏附能力与生物膜形成能力，是引发皮肤软组织感染、败血症、肺炎等多种疾病的核心毒力基础。
三、培养与保存条件
培养条件
推荐使用营养琼脂培养基或 LB 培养基进行常规培养，用于临床样本分离时优先选用含 7.5% 氯化钠的甘露醇高盐琼脂培养基（选择性分离，金黄色葡萄球菌可发酵甘露醇使培养基变黄）或血琼脂培养基（观察溶血特性）。接种时，固体培养采用划线接种法（分离单菌落，需 2-3 次划线以获得纯培养），液体培养采用接种环接种或菌悬液接种（接种量 1%-2%，体积比）；接种后，固体培养基置于 35-37℃恒温培养箱内静置培养 18-24 小时，液体培养基置于 35-37℃、150-180rpm 摇床振荡培养 16-20 小时，兼性厌氧环境即可满足生长需求，无需额外补充 CO₂。液体培养后期，菌液呈均匀浑浊状，菌浓度可达 10⁹-10¹⁰CFU/mL，且能最大程度保留菌株的毒力因子表达能力（如肠毒素分泌量、溶血活性）。培养过程中需严格控制温度波动（不超过 ±1℃），限制传代次数（建议不超过 5 代），防止菌株因传代过多导致色素产生能力减弱、凝固酶活性下降或毒力因子表达量降低。
保存条件
短期保存（1-2 周）：采用斜面培养基保存法，取培养 18 小时的纯培养菌株（确保金黄色色素、凝固酶阳性），接种至营养琼脂斜面，35-37℃培养 12 小时后，立即转移至 4℃冰箱冷藏，每 3-4 天观察一次，若发现菌落干燥、污染或色素变淡，需重新接种。
长期保存（3 年以上）：推荐两种高效方法，
1.冷冻干燥保存法：取对数生长期菌液（OD600=0.8-1.0），与含 10% 脱脂乳 + 0.5% 酵母提取物的复合保护剂按 1:1 混合，分装至无菌冷冻管（每管 0.5mL），梯度降温（-20℃预冻 3 小时→-80℃冷冻 6 小时）后进行冷冻干燥，干燥完成后置于 - 80℃冰箱保存，保存期限可达 5-8 年，复苏后毒力因子表达能力保留率≥95%；
2.甘油冷冻保存法：将对数生长期菌液与无菌甘油（终浓度 20%）混合均匀，分装至无菌冷冻管（每管 1mL），直接置于 - 80℃冰箱保存，保存期限可达 3-5 年，该方法操作简便，适合实验室常规保存，但需注意避免反复冻融（每次冻融会导致 10%-15% 菌体失活，且可能影响毒力特性）。
长期保存期间，建议每 12 个月复苏一次菌株，复苏后通过革兰氏染色（确认形态与染色特性）、菌落形态观察（验证金黄色色素）、凝固酶试验（检测凝固酶活性）、溶血试验（血琼脂上观察溶血环）、毒力因子检测（如 ELISA 法检测肠毒素），全面验证菌株纯度与生理毒力活性，确保后续使用性能稳定。
四、应用领域
致病机制研究
作为金黄色葡萄球菌的标准菌株，ATCC9144 是研究其致病机制的核心材料。可用于解析菌株对宿主细胞的黏附 - 侵袭机制（如黏附蛋白与宿主细胞受体的结合特性）、毒力因子（溶血毒素、肠毒素、TSST-1）的表达调控规律及作用机制（如 α- 溶血毒素对细胞膜的穿孔效应、肠毒素引发呕吐腹泻的分子通路）；同时可用于探究菌株生物膜形成机制（如胞外多糖基质合成过程）、免疫逃逸策略（如抑制中性粒细胞吞噬、干扰补体系统激活），为皮肤软组织感染、食物中毒、中毒性休克综合征等疾病的防控策略（如新型疫苗研发、毒力抑制剂筛选）研究提供基础数据支持。
诊断试剂研发与质量控制
在诊断试剂领域，该菌株可用于金黄色葡萄球菌核酸检测试剂盒（如 PCR 检测 nuc 基因、毒力因子基因）、抗原检测试剂盒（如免疫层析法检测葡萄球菌 A 蛋白、肠毒素）、血清学检测试剂（如抗体 ELISA 试剂盒）的研发与性能验证。通过检测试剂的灵敏度（最低检测限≤10²CFU/mL，适配临床样本低浓度感染检测）、特异性（无交叉反应，排除表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌干扰）、批间一致性（CV≤5%），确保临床实验室可快速诊断金黄色葡萄球菌感染，食品安全检测机构可及时筛查食品污染（如肠毒素检测）。同时，可作为临床与食品微生物实验室检测方法（如选择性培养、生化鉴定、质谱检测）的质量控制菌株，定期验证检测方法的准确性（如甘露醇高盐琼脂对菌株的分离回收率≥90%），避免因方法误差导致的感染漏诊或食品污染误判。
抗菌药物研究与感染防控
在抗菌药物研究领域，该菌株可作为抗菌药物敏感性试验的标准参照菌株，采用肉汤稀释法或纸片扩散法（Kirby-Bauer 法），检测 β- 内酰胺类（青霉素、头孢唑林）、大环内酯类（红霉素、克林霉素）、氟喹诺酮类（左氧氟沙星、环丙沙星）、糖肽类（万古霉素）等临床常用抗菌药物的最小抑菌浓度（MIC），建立金黄色葡萄球菌的药敏判断标准，为临床治疗（如败血症、肺炎）合理用药提供依据，尤其可用于监测耐药菌株（如耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 MRSA、耐万古霉素金黄色葡萄球菌 VRSA）的耐药机制（如 mecA 基因携带、vanA 基因表达）与扩散规律。在感染防控领域，可用于消毒剂效果验证（如酒精、含氯消毒剂对菌株的杀灭率）、医疗器械消毒工艺优化（如高温灭菌、紫外线消毒参数调整）；同时可用于医院感染防控研究（如菌株在环境表面的存活时间、传播途径模拟），助力构建 “诊断 - 治疗 - 防控” 的全链条感染管理体系。
五、安全注意事项
该菌株为高致病性微生物（生物安全二级 BSL-2，MRSA 等耐药株列为 BSL-2+），可通过皮肤黏膜接触、呼吸道飞沫、污染食品 / 医疗器械等途径传播，引发皮肤软组织感染、败血症、食物中毒、中毒性休克综合征等严重疾病，操作时需严格遵守 BSL-2 实验室规程：
1.个人防护：穿戴无菌乳胶手套、N95 口罩、护目镜、一次性防护服，处理高浓度菌液（如离心、超声破碎）、毒力因子提取或污染样本（如伤口分泌物、食品匀浆）时需佩戴面屏与防滑鞋套，避免皮肤黏膜直接接触；
2.操作限制：所有接种、菌液转移、样本处理、离心等操作需在生物安全柜内完成，禁止在开放台面操作；振荡培养使用密封摇瓶，离心时使用带盖离心管并平衡，避免产生含菌气溶胶（气溶胶可存活数小时，易引发呼吸道感染）；
3.废弃物处理：使用过的培养基、离心管、接种环、污染样本需装入耐高温生物安全袋，密封后经 121℃、30 分钟高压蒸汽灭菌处理（含耐药株或高浓度菌液的废弃物需延长灭菌时间至 45 分钟）；一次性防护用品灭菌后按医疗废弃物规范处置；生物安全柜内壁、实验台面、离心机等仪器设备使用后，用 75% 乙醇溶液或 0.5% 次氯酸钠溶液擦拭消毒，作用 30 分钟后用无菌水清洁，每周对生物安全柜进行 HEPA 过滤器完整性检测；
4.应急处理：若菌液泼洒或样本泄漏，立即关闭生物安全柜风机，撤离实验室人员，隔离污染区域，30 分钟后由专业人员穿戴正压防护服进入，用浸有 75% 乙醇的纱布覆盖污染表面 30 分钟后清理，清理后对污染区域进行环境采样检测；若人员皮肤接触，立即用生理盐水冲洗 15 分钟 + 碘伏消毒；若吸入气溶胶或误食，立即就医并告知医生菌株接触史，临床可根据感染类型使用万古霉素或 β- 内酰胺类抗生素进行治疗。
菌株需专人管理，建立 “双人双锁” 储存制度，储存位置明确标识 “高致病性微生物（金黄色葡萄球菌 ATCC9144 WDCM 00035）”，远离食品、水源、医疗器械储存区及儿童活动区域。领用需填写《ATCC9144 金黄色葡萄球菌领用登记表》，详细记录领用人员（需具备 BSL-2 操作资质）、领用时间、领用数量、使用用途（仅限科研 / 检测 / 教学，禁止用于生物武器相关研究）、使用地点及归还时间；严禁将菌株转让给无资质单位或个人，不得擅自扩大培养菌株或用于食品污染模拟实验后未经灭菌直接排放；涉及耐药株研究时，需额外遵守国家抗菌药物耐药性监测与管理相关规定，防止耐药基因扩散。
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