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ATCC700327卡氏肠球菌Enterococcus casselifavus

ATCC 700327 卡氏肠球菌(Enterococcus casselifavus)产品说明一、菌株基本信息ATCC 700327 是美国典型培养物保藏中心(ATCC)收录的标准卡氏肠球菌菌株,分类学隶属于厚壁菌门肠球菌科肠球菌属,为革兰氏阳性兼性厌氧球菌。其生物学特性稳定,因具有天然耐万古霉素特性(携带 vanC1 基因),是临床肠球菌耐药性监测、菌种

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ATCC 700327 卡氏肠球菌(Enterococcus casselifavus)产品说明
一、菌株基本信息
ATCC 700327 是美国典型培养物保藏中心(ATCC)收录的标准卡氏肠球菌菌株,分类学隶属于厚壁菌门肠球菌科肠球菌属,为革兰氏阳性兼性厌氧球菌。其生物学特性稳定,因具有天然耐万古霉素特性(携带 vanC1 基因),是临床肠球菌耐药性监测、菌种鉴别及抗菌药物敏感性试验(AST)的重要参考株,广泛用于万古霉素耐药肠球菌(VRE)检测方法验证、肠球菌属分类研究,在临床微生物检测与耐药防控领域具有关键实用价值。
二、核心特性
  1. 形态与生化:菌体呈球形或椭圆形,直径 0.5-1.0μm,常成对或短链状排列(链长 2-6 个细胞),无芽孢,部分菌株具周生鞭毛(具微弱运动性)。最适生长温度 30-37℃,耐受温度范围 10-45℃,适宜 pH 6.0-8.0,兼性厌氧(有氧环境生长略优于无氧);生化特征独特:可发酵葡萄糖、乳糖产酸(不产气),不发酵甘露醇、山梨醇,触酶阴性,氧化酶阴性,硝酸盐还原试验阴性;耐逆性强,能在含 6.5% 氯化钠的高渗培养基、40% 胆汁盐环境中生长,可水解七叶苷,且因产生黄色色素(部分菌株),菌落常呈淡黄色(与其他肠球菌的乳白色菌落区分的关键特征);天然携带 vanC1 基因,对万古霉素呈低至中度耐药(MIC 值通常为 4-16μg/mL),对替考拉宁敏感,这是其与 vanA、vanB 型耐药肠球菌的核心差异。

  1. 致病性相关:属于低毒力条件致病菌,自然存在于土壤、植物及人和动物肠道中,对健康人群无显著致病风险;仅在机体免疫功能严重低下(如长期使用免疫抑制剂、重症监护患者)时,偶发尿路感染、腹腔感染等轻度感染。ATCC 700327 毒力稳定,主要用于临床 VRE 鉴别(区分天然耐药与获得性耐药)、耐药机制研究的模式株,及 AST 实验中天然耐药质控的阳性对照。

三、培养与保存
  1. 培养:无需特殊气体环境,常规有氧培养即可。推荐培养基包括:脑心浸液琼脂(BHI,用于菌株活化与纯培养,菌落呈淡黄色、表面光滑湿润,直径 0.8-1.5mm,质地柔软,部分菌株色素需培养 48 小时后更明显)、麦康凯琼脂(MAC,因不发酵乳糖,菌落呈无色透明或淡黄色,直径 0.8-1.2mm)、万古霉素选择性培养基(含 6μg/mL 万古霉素的 BHI 琼脂,用于耐药株筛选,菌落形态与 BHI 一致,可抑制敏感肠球菌生长)、血琼脂(用于观察溶血特性,多数菌株呈 α- 溶血,少数为 γ- 溶血)。37℃培养 24-48 小时后,BHI 与选择性培养基上形成典型菌落,黄色色素与耐药特性便于快速鉴别。

  1. 保存:短期保存(1-4 周):将活化后的纯菌株接种至 BHI 琼脂斜面,37℃培养 18-24 小时后,密封斜面管口(防止色素氧化与杂菌污染),置于 4℃冰箱冷藏,期间每 2 周观察 1 次,若出现菌落褪色、萎缩或污染需立即重新活化;长期保存(1 年以上):采用 - 80℃甘油冷冻保存(20% 无菌甘油与对数期菌液按 1:1 体积混合,分装冻存管,避免反复冻融导致耐药基因稳定性下降),或冻干保存(以 10% 脱脂乳为保护剂,冻干后置于 - 20℃以下干燥环境)。复苏时,将冻存菌液或冻干菌粉接入 BHI 肉汤,37℃振荡培养 12-16 小时(转速 180-200rpm),待菌液 OD600 值达 0.6-0.8(对数生长期)后,转接万古霉素选择性培养基纯化,复苏后需通过 AST 验证耐药特性(万古霉素 MIC 符合标准范围)与生化反应(如黄色色素、七叶苷水解),确保菌株特性未改变。

四、应用与安全
  1. 应用:在临床检测领域,作为 VRE 鉴别诊断的质控株,用于验证耐药基因检测试剂盒(如 vanC1 基因检测)、AST 方法(纸片扩散法、肉汤稀释法)的准确性,帮助实验室区分天然耐药(vanC 型)与获得性耐药(vanA/vanB 型)VRE,避免误诊;在科研领域,用于肠球菌天然耐药机制研究(如 vanC1 基因表达调控、耐药蛋白功能),及新型抗 VRE 药物(针对天然耐药株)的体外活性评价;在食品检测领域,作为食品(如蔬菜、肉制品)中肠球菌污染检测的参考株,评估选择性培养基对耐药肠球菌的检出能力;在教学领域,用于微生物学实验,演示肠球菌属菌种鉴别(色素、耐药性)与耐药性检测原理,强化耐药防控认知。

  1. 安全:需在生物安全二级(BSL-2)实验室操作(因携带耐药基因,存在耐药性传播风险);涉及菌液移液、离心、平板涂布等可能产生气溶胶的操作,需在生物安全柜内进行,操作人员需佩戴无菌手套、口罩、护目镜,避免皮肤接触菌液或吸入气溶胶;实验后,所有污染耗材(培养皿、吸头、离心管、接种环)需 121℃高压灭菌 30 分钟以上(确保彻底杀灭菌株),实验台面用含氯消毒剂(有效氯 2000mg/L)擦拭消毒,再用 75% 乙醇二次消毒;菌株储存需单独存放于专用 BSL-2 实验室冰箱,冻存管清晰标注 “ATCC 700327 卡氏肠球菌(vanC1 型,万古霉素天然耐药)”、保存日期及操作人员,严禁与敏感肠球菌或其他致病菌混合存放,防止耐药基因交叉污染,避免实验室耐药株扩散。



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