ATCC10708 猪霍乱沙门氏菌（Salmonella choleraesuis）产品说明
一、菌株基础信息
本品对应菌株为 ATCC10708 猪霍乱沙门氏菌（Salmonella choleraesuis），隶属于肠杆菌科沙门氏菌属，是经 ATCC（美国典型培养物保藏中心）通过基因测序（16S rRNA 及 invA 毒力基因鉴定）、血清型鉴定（O6,7:H1,5）、生化特征验证及人畜致病性检测等多维度标准化流程严格鉴定，并采用专业低温保藏技术留存的标准菌株。该菌株遗传背景清晰可追溯，经长期传代监测显示遗传特性稳定无变异，生物学特征（尤其是血清型、毒力表型）具有高度可重复性，作为典型的人畜共患致病性沙门氏菌（主要宿主为猪，可感染人类），是微生物领域沙门氏菌人畜共患感染机制研究、猪霍乱防控分析、临床与兽医诊断技术开发及抗菌药物敏感性试验的核心参照菌株。其专属菌株编号具备全球唯一性，可实现从菌株获取、实验操作到结果分析的全流程溯源，有效保障不同实验室、不同批次实验数据的精准比对，为猪霍乱沙门氏菌相关科研项目的严谨性与人畜共患病防控工作的可靠性提供关键技术支撑。
二、生物学特性
形态特征
该菌株为革兰氏阴性短杆菌，显微镜下呈直杆状，两端钝圆，大小均一，长约 1.2-2.5μm，宽约 0.4-0.6μm，无芽孢生成，不具备荚膜结构，所有菌株均具有周生鞭毛（H 抗原），可自主运动（运动性强，显微镜下呈 “穿梭样” 运动）。在普通营养琼脂培养基上培养后，形成的菌落呈乳白色、半透明状，质地湿润且表面光滑，边缘整齐无锯齿，直径约 1.0-1.5mm，无色素产生；在 SS 选择性培养基（Salmonella-Shigella Agar）上，因不分解乳糖，菌落呈无色透明状，周围培养基无变色（与大肠杆菌的红色菌落形成明显区分）；在麦康凯培养基上，菌落同样呈无色透明状，部分菌株培养后期因微量产酸可能导致菌落中心略带淡红色，这一选择性培养基上的菌落特征是该菌株初步分离鉴定的核心依据。
生理生化特性
该菌株为兼性厌氧微生物，最适生长温度适配猪与人类体温，处于 35-37℃区间，最适 pH 值为 6.8-7.4，生长过程对营养要求不高，在普通营养琼脂、LB 培养基、TSB 培养基中均可良好生长，在含胆盐的选择性培养基（如 SS、HE 培养基）中能耐受胆盐抑制并正常繁殖。生化反应试验中，氧化酶试验阴性（肠杆菌科典型特征），触酶试验阳性（分解过氧化氢产氧），硝酸盐还原试验阳性（将硝酸盐转化为亚硝酸盐），吲哚试验阴性（不产生吲哚），甲基红试验阳性（发酵葡萄糖产酸），VP 试验阴性（不产乙酰甲基甲醇），柠檬酸盐利用试验阳性（以柠檬酸盐为唯一碳源），尿素酶试验阴性（不分解尿素），赖氨酸脱羧酶试验阳性（分解赖氨酸产胺）；糖类发酵方面，可发酵葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、山梨醇，发酵过程产酸产气；不发酵乳糖、蔗糖、阿拉伯糖、棉子糖，这一生化反应模式是区分猪霍乱沙门氏菌与其他肠道致病菌（如猪伤寒沙门氏菌、大肠杆菌）的关键指标。此外，该菌株携带多种毒力基因（如 invA、spaO、sopB），具有强侵袭性，可穿透肠道上皮细胞并在巨噬细胞内增殖，是引发猪霍乱（急性败血症）与人类食物中毒、败血症的核心毒力基础。
三、培养与保存条件
培养条件
推荐使用营养琼脂培养基或 LB 培养基进行常规培养，用于临床 / 兽医样本分离时优先选用 SS 选择性培养基或 HE 培养基（Hektoen Enteric Agar）。接种时，固体培养采用划线接种法（分离单菌落，需 3 次以上划线以获得纯培养），液体培养采用接种环接种或菌悬液接种（接种量 1%-2%，体积比）；接种后，固体培养基置于 35-37℃恒温培养箱内静置培养 18-24 小时，液体培养基置于 35-37℃、150-180rpm 摇床振荡培养 16-20 小时，兼性厌氧环境即可满足生长需求，无需额外补充 CO₂。液体培养后期，菌液呈均匀浑浊状，菌浓度可达 10⁹-10¹⁰CFU/mL，且能最大程度保留菌株的鞭毛表达与侵袭能力（如对猪小肠上皮细胞的黏附率）。培养过程中需严格控制温度波动（不超过 ±1℃），限制传代次数（建议不超过 4 代），防止菌株因传代过多导致鞭毛丢失、毒力减弱（如 invA 基因表达量下降）。
保存条件
短期保存（1-2 周）：采用斜面培养基保存法，取培养 18 小时的纯培养菌株，接种至营养琼脂斜面，35-37℃培养 12 小时后，立即转移至 4℃冰箱冷藏，每 3 天观察一次，若发现菌落干燥、污染或出现自溶（菌液浑浊度下降），需重新接种。
长期保存（3 年以上）：推荐两种方法，
冷冻干燥保存法：取对数生长期菌液（OD600=0.8-1.0），与含 10% 脱脂乳 + 0.5% 酵母提取物的保护剂按 1:1 混合，分装至无菌冷冻管（每管 0.5mL），梯度降温（-20℃预冻 3 小时→-80℃冷冻 6 小时）后冷冻干燥，干燥后置于 - 80℃冰箱，保存期限可达 5-8 年；
甘油冷冻保存法：将对数生长期菌液与无菌甘油（终浓度 20%）混合均匀，分装至无菌冷冻管，直接置于 - 80℃冰箱，保存期限可达 3-5 年，该方法操作简便，适合实验室常规保存，但需注意甘油浓度不可过高（超过 25% 会导致细胞脱水）。
长期保存期间，建议每 10-12 个月复苏一次，复苏后通过革兰氏染色（确认形态）、鞭毛染色（观察运动性）、血清凝集试验（验证血清型）、细胞侵袭试验（检测对 HeLa 细胞的侵袭率），全面验证菌株纯度与毒力活性，确保后续使用性能稳定。
四、应用领域
人畜共患感染机制研究
作为猪霍乱沙门氏菌的标准菌株，ATCC10708 是研究其跨宿主感染机制的核心材料。可用于解析菌株对猪肠道上皮细胞的黏附 - 侵袭通路（如鞭毛蛋白 FliC 与宿主细胞 TLR5 的相互作用）、胞内增殖机制（如沙门氏菌致病岛 SPI-2 编码的毒力蛋白对巨噬细胞凋亡的抑制），以及宿主特异性差异（如对猪与人类巨噬细胞的杀伤能力差异）；同时可用于探究猪霍乱的传播途径（如饲料污染、接触传播）、免疫逃逸机制（如荚膜多糖对补体系统的抑制），为猪霍乱疫苗研发（如减毒活疫苗、亚单位疫苗）与人畜共患感染防控策略（如养殖场生物安全体系构建）提供基础数据支持。
诊断试剂研发与质量控制
在诊断试剂领域，该菌株可用于猪霍乱沙门氏菌核酸检测试剂盒（如 PCR 检测 O 抗原基因 rfbE、毒力基因 invA）、抗原检测试剂盒（如免疫层析法检测 O6,7 抗原）、血清学检测试剂（如猪霍乱抗体 ELISA 试剂盒）的研发与性能验证。通过检测试剂的灵敏度（最低检测限≤10³CFU/mL）、特异性（无交叉反应）、批间一致性（CV≤5%），确保兽医实验室可快速诊断猪霍乱疫情，临床实验室可及时识别人类感染病例。同时，可作为临床 / 兽医微生物实验室检测方法（如选择性培养、生化鉴定、血清凝集）的质量控制菌株，定期验证检测方法的准确性（如 SS 培养基的分离效率），避免因方法误差导致的疫情误判或漏诊。
抗菌药物研究与兽医防控
在抗菌药物研究领域，该菌株可作为抗菌药物敏感性试验的标准参照菌株，采用肉汤稀释法检测氟苯尼考、恩诺沙星、头孢噻呋、多西环素等兽医常用抗菌药物的最小抑菌浓度（MIC），建立猪霍乱沙门氏菌的药敏判断标准，为养殖场合理用药提供依据（如避免滥用氟苯尼考导致耐药菌株扩散）；同时可用于新型抗菌药物筛选（如植物源抗菌成分、噬菌体），评估候选药物对耐药菌株的抑制效果。在兽医防控领域，可用于猪霍乱减毒疫苗的免疫效果评估（如检测免疫猪血清中的中和抗体效价），以及养殖场环境消毒效果验证（如评估次氯酸钠、过氧乙酸对菌株的杀灭率），助力构建猪霍乱综合防控体系。
五、安全注意事项
该菌株为高致病性人畜共患微生物（生物安全二级 BSL-2，部分国家列为 BSL-2+），可通过消化道（食用污染猪肉 / 食品）、接触（处理病猪）传播，引发猪急性败血症（死亡率高达 80%）与人类食物中毒、败血症（免疫力低下人群死亡率约 10%），操作时需严格遵守 BSL-2 实验室规程：
个人防护：穿戴无菌乳胶手套、N95 口罩、护目镜、一次性防护服，处理高浓度菌液（如离心、超声破碎）时需佩戴面屏；
操作限制：所有接种、菌液转移、样本处理需在生物安全柜内完成，禁止在开放台面操作，避免产生含菌气溶胶（如振荡时使用密封摇瓶）；
废弃物处理：使用过的培养基、离心管、接种环需装入耐高温生物安全袋，121℃高压灭菌 30 分钟后丢弃；一次性防护用品灭菌后按医疗废弃物处置；污染台面用 0.5% 次氯酸钠溶液擦拭消毒，作用 30 分钟后用无菌水清洁；
应急处理：若菌液泼洒，立即用浸有 0.5% 次氯酸钠的纱布覆盖 30 分钟，再由专业人员清理；若人员皮肤接触，立即用生理盐水冲洗 15 分钟 + 碘伏消毒；若吸入气溶胶，立即转移至通风处，就医并告知菌株接触史，必要时使用头孢曲松预防性治疗。
菌株需专人管理，建立 “双人双锁” 储存制度，储存位置标识 “高致病性人畜共患病菌”，远离食品、饲料及动物饲养区。领用需填写《ATCC10708 猪霍乱沙门氏菌领用登记表》，记录领用人员（需具备 BSL-2 操作资质）、用途（仅限科研 / 检测）、使用地点；严禁转让给无资质单位，不得擅自扩大培养或用于动物实验（需经动物伦理审批）。
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